終末分化した心筋細胞の機能維持機構の解析

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11877113
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 徳久 剛史 千葉大学, 大学院・医学研究科, 教授 (20134364)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岡田 誠治 千葉大学, 大学院・医学研究科, 助手 (50282455) ; 幡野 雅彦 千葉大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (20208523)
• Keywords: BCL6 / BAZF / ノックアウトマウス / 転写抑制 / アポトーシス / 心筋細胞

Research Abstract

本研究は、BCL6ノックアウト(KO)マウスにみられた心筋細胞死の誘導機序をBCL6の標的遺伝子の解析を含めた分子のレベルで解明したり、BAZF-KOマウスを作製してその心筋細胞における機能を解明することにより、終末分化した心筋細胞の機能維持機構を明らかにすることを目的とした。そして、以下の点について明らかにした。
1)BCL6の転写抑制機序の解析:BCL6とそのファミリー遺伝子であるBAZFの転写抑制活性に重要な部分(17アミノ酸)を明らかにした。そこで、BCL6による転写抑制機序を解析した。その結果、17アミノ酸部のみで転写制御活性を見いだし、この抑制活性がHistone deacethylase(HDAC)の阻害剤であるTSA(Trichostatin A)により完全に消失することを見出した。
2)BCL6の強発現による細胞死誘導機序の解析:BCL6を構成する17アミノ酸部とDNA結合ドメインをコードする遺伝子の培養細胞への強発現によりアポトーシスが誘導され、かつBCL6から17アミノ酸部分を取り除いた遺伝子の強発現では、アポトーシスは起こらなかったことから、BCL6はこの17アミノ酸の部分を介してアポトーシスを誘導していることが示唆された。また、このアポトーシスは培養系にHDACの阻害剤であるTSAを添加しておくと起こらなくなることから、BCL6がこの17アミノ酸部分を介してHDAC複合体の染色体DNAへのリクルートを介して細胞死が誘導されることを明らかにした。
3)BAZF-KOマウスの作製とその心筋細胞における機能を解明:ES細胞への遺伝子ターゲッティングは成功しており、キメラマウスを作製中である。

Research Products

• [Publications] Okada, S.: "Overexpression of c-fos suppresses cell cycle entry of dormant hematopoietic stem cells"Blood. 93. 816-825 (1999)
• [Publications] Yoshida, T.: "A role of Bc16 in mature cardiac myocytes"Cardiovasc. Res.. 42. 670-679 (1999)
• [Publications] Kobayashi, K.: "Expression of a murine homologue of inhibitor of apoptosis protein (IAP) is related to cell proliferation"Proc. Natl. Acad. Sci. USA.. 96. 1457-1462 (1999)
• [Publications] Iitsuka, Y.: "Tran scriptional regulation of the Ncx (Enx, Hox1 1L1) gene in neuronal cells derived from neural crest"J. Biol. Chem.. 274. 24401-24407 (1999)
• [Publications] Kawasaki, H.: "Increased c-Fos/AP-1 confers resistance against anergy on antigen-specific T cells"Int. Immunol.. 11. 1873-1880 (1999)
• [Publications] Honda, A.: "Hepatitis C virus structural proteins induce liver cell injury in transgenic mice"J. Med. Virol.. 59. 281-289 (1999)