1999 Fiscal Year Annual Research Report
血管内皮細胞の遊走機能に関する新しいリン脂質結合蛋白質のクローニング
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11877118
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
斎藤 能彦 京都大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (30250260)
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| Keywords | リン脂質 / 遊走活性 / 血管内皮細胞 |
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| Research Abstract |
脂質が血管に豊富な組織であることより、血管内皮細胞の遊走活性を指標に、脂質に存在する血管新生誘導因子を検索してきた。大綱組織をメタノ-ル抽出した分画に血管内皮細胞遊走活性を認め、4段階の精製の結果、その遊走活性の本体がphosphatidyl ethanolamine(PE)であることがわかった。
この結果を受けて、各種リン脂質の内皮細胞遊走活性に及ぼす効果を検討するとPEの他phosphatidyl serine(PS)にも活性を認め、phosphatidyl chorine(PC)には活性を認めなかった。
さらに大網を水抽出した場合にはTLCの移動度がPEとPSの間にも強い遊走活性を認め、この分画活性をまず精製することにした。順相カラム、TLCを組み合わせ、その後逆相カラムで精製に成功した。この純品をMRlおよび質料分析装置で検討した結果、この物質はphosphatidyl glycerol(PG)と同定できた。
PE、PS、PGを用いて遊走活性に対する各種細胞内情報伝達系のブロッカ-を用いて検討した結果、この遊走活性はPKC依存性であることが分かった。
これらの結果を基に、PS、PE、PG結合蛋白へクロ-ニングを行う。
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[Publications] N.Tamura: "Cardiac fibrosis in mice lacking brain natriuretic peptide"Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (in press). (2000)
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[Publications] I..Hamanaka: "Effects of Cardiotrophin-1 on Hemodynamics and Endocrine Function of the Heart"Am.J.Physiol.. (in press). (2000)
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[Publications] E.Ogwa: "Outside-in Signaling of Fibronectin Stimulates Cardiomyocyte Hypertrophy in Cultured Neonatal Rat Ventricular Myocytes"J.Mol.Cell.Cardiaol. (in press). (2000)
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[Publications] M.Nakayama: "T-786 C mutation in the endothelial nitric oxide synthase gene is associated with coronary spasm : reduction in promoter activity"Circulation. 99・22. 2864-2870 (1999)
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[Publications] K.Kuwahara: "Involvement of cardiotrophin-1 in cardiac myocyte-nonmyocyte interactions during hypertrophy of rat cardiac myocytes in vitro"Circulation. 100・10. 1116-1124 (1999)
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[Publications] K.Kuwahara: "The Effects of the selective ROCK inhibitor, Y27632, on ET-1-induced hypertrophic responses in neonatal rat cardiac myocytes-possible involvement of Rho/ROCK pathway in cardiac muscle cell hypertrophy-"FEBSLetters. 452・3. 314-318 (1999)
