2000 Fiscal Year Annual Research Report
腫瘍マーカーとしてのカルシウム調節ホルモン・スタニオカルシン
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11877416
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
佐々木 毅 東北大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (50110656)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
舩渡 忠男 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (70165455)
張替 秀郎 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (50302146)
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| Keywords | スタニオカルシン / 白血病 / ELISA / 微量残存病変 |
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| Research Abstract |
1.血中スタニオカルシン(STC)測定系の開発
(i)リコンビナントヒトSTC及びそのペプタイドをキャリア蛋白KLHと結合して免疫し、IgG型モノクロナル抗ヒトSTC抗体(STCmAb)産生ハイブリドーマを得た。
(ii)STCmAbは蛍光抗体法及びSDS PAGE後のイムノブロット法によりヒト腎尿細管細胞成分と反応することを確認した。
(iii)2種類のSTCmAb及びポリクロナル抗体を用いてサンドイッチ法によりSTC測定のためのELISA法を確立した。
(iv)リコンビナントヒトSTCをスタンダード抗原として(iii)の系で測定し、標準曲線を作成したところ5-10ng/ml以上のSTCが測定可能とされた。これに基づき、各種疾患、正常人血中でのSTCを測定した。しかし検出は難しく、より高感度の測定系の開発が必要とされた。
2.STCmRNA定量の臨床的意義の追求
(1)STCmRNAの定性的測定系をnested reverse transcription-polymerase chain reaction(nested RT-PCR)法として、定量的測定系はリアルタイムRT-PCR法として確立し、STCmRNA測定による白血病の診断、とくにminimal residual disease(MRD)マーカーとしての意義に関して追求した。
(2)白血病症例の骨髄血では、種々のタイプの白血病症例で高率にSTCmRNAを検出したが、健常人の骨髄血でも検出された。一方末梢血に関しては、白血病症例13例12例でSTCmRNAの発現を認めたが、健常人では28例全例でSTCmRNAの発現が認められなかった。
(3)白血病症例の末梢血におけるSTCmRNAを定量したところ、急性期AML20例中6例、T-ALL4例中3例、Adulr T cell leukemia(ATL)2例中2例がSTCmRNA値の高値を示した。STCmRNA値が高値であった例はいずれも寛解期に低値になった一方寛解期の多くはカットオフ値以内を示した。以上よりSTCmRNAの定量は白血病の診断、予後の推定に有用と考えられる。
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[Publications] Rahman,M..,Sasaki,T., et al.: "A repressor element in the 5'-untranslated region of human Pax 5 exon 1A."Gene. 263. 59-66 (2001)
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[Publications] Takahashi,M,Sasaki,T, et al: "Measurement of tumor necrosis factor-α messenger RNA in synovial fibroblasts by real-time quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction."J.Lab.Clin.Med.. 137. 101-106 (2001)
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[Publications] Suzuki,Y.,Sasaki,T., et.al.: "Chemically modified ribozyme to V gene inhibits anti-DNA production and the formation of immune deposits caused by lupus lymphocytes."J.Immunol.. 165. 5900-5905 (2000)
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[Publications] Funato,T.,Sasaki,T., et al.: "Anti-K-ras rybozyme induced a growth inhibition and an increased chemosensitivity of human colon cancer cells."Cancer Gene Therapy. 165. 495-500 (2000)
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[Publications] Funato,T.,Sasaki,T., et.al.: "In vitro leukemia cell models of Ara-C resistance."Leukemia Research. 24. 535-541 (2000)
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[Publications] Takahashi,S,Sasaki,T, et al.: "Cloning of a coproporphyrinogen oxidase promoter regulatory element binding protein."Biochem.Biophy.Res.Com.. 273. 596-602 (2000)
