1999 Fiscal Year Annual Research Report
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11878133
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| Research Institution | Osaka Medical College |
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Principal Investigator |
和田 明 大阪医科大学, 医学部, 助教授 (80025387)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉田 秀司 大阪医科大学, 医学部, 助手 (60288735)
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| Keywords | プロテオーム / 二次元電気泳動法 / 大腸菌 / 加齢 / 定常期 / 翻訳 / リボソーム / ribosome modulation factor |
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| Research Abstract |
我々はこれまでに2%ポリペプトンを加えた最小培地Eで大腸菌を培養し、約7日間継続する定常期を、対数期に成立した細胞集団のlife timeと定義した。そして、この定常期に形成される100Sリボソームの消長を指標として見ると、定常期が4つのsubphaseからなるmultiphasicな過程であり、このsubphaseの一方向的な移行を大腸菌の加齢現象として捉えることができることを示した。
今回我々は、先ずこの100S形成を担うribosome modulation factor(RMF)の発現を転写と翻訳の両面で定常期の全域に亘って調べた。その結果、RMFは定常期のほぼ全域で転写され続けており、RMFの量的制御の第一段階が転写のレベルにあることが明らかとなった。加えて、RMF蛋白量は100Sリボソームと化学量論的関係を維持しており、かつ遊離のRMFが検出されないことを考え合わせると、何らかのRMF分解過程が量的制御の第二段階として存在することが予想される。
次いで、RFHR(radical-free and highly reducing)電気泳動法の二次元ゲル上で検出しうる全蛋白の、定常期における時間変化を調ベ、その発現パターンを12のタイプに分類した。その結果、サンプリングした時間毎及び日毎に最大量を示す蛋白群が存在することが確認された。このことは大腸菌が細胞中に存在する蛋白のline upとその量を刻々変化させつつ定常期での生存率を維持していくことを示している。
この一方向的でドミノ倒し的な蛋白の変化は100S形成で見られた大腸菌の加齢現象を更に精緻に、かつ包括的に解析しうることを意味する。
今後これら蛋白の発現が相互にどのように関係しているかを明らかにしていきたい。
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[Publications] Akira WADA: "Growth Phase-Coupled Changes of the Ribosome Profile in Natural Isolates and Laboratory Strains of Escherichia coli"J.Bacteriology. (in press). (2000)
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[Publications] Yasushi Maki: "Stoichiometric analysis of barley plastid ribosomal proteins"Plant and Cell Physiology. (in press). (2000)
