2011 Fiscal Year Annual Research Report
非宿主抵抗性因子の単細胞系スクリーニングを用いた新規植物ウイルス抵抗性戦略の構築
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11J06256
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
前島 健作 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 特別研究員(PD)
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| Keywords | 非宿主抵抗性 |
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| Research Abstract |
本年度は、植物ウイルスに対する非宿主抵抗性因子をスクリーニングすることを目的として、まず複数のRNAウイルスを用いて感染性クローンの構築をおこなった。手法としては、ウイルスに感染した植物からトータルRNAを調整し、逆転写反応により完全長cDNAを合成したのちに、PCRによりウイルスの完全長cDNAを増幅し、バイナリベクター上の35Sプロモーター直下にクローニングした。このプラスミドをアグロバクテリウムに形質転換導入し、植物に注入した結果、ウイルスの感染が確認された。このプラスミド中のウイルスにGFP配列を挿入することにより、GFP発現ウイルスを構築した。次に、構築したGFP発現ウイルスを用いて非宿主植物を探索した結果、ウイルスが感染しないシロイヌナズナエコタイプを複数見出した。そこで、これらシロイヌナズナエコタイプを用いてマッピングと完全長cDNAスクリーニングをおこなった結果、抵抗性因子を1つ特定することができた。この因子は、植物のウイルスに対する非宿主抵抗性の一端を担っていると考えられた。その性状に関しては現在解析をおこなっている。
また、その他に複数の植物ウイルスについて塩基配列やタンパク質発現様式等の基礎的な性状を解析した。それらウイルスには日本初発生のウイルスも含まれており、海外においてもほとんど解析が進んでいないため、上記のような非宿主抵抗性の解析をおこなうためには、今後も充分に性状を明らかにする必要があると考えられた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度は非宿主植物の特定とその完全長cDNAの合成を計画しており、そのいずれも達成できている。
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度は当初の予定通り、プロトプラストレベルでの機能スクリーニング解析と、植物体レベルでの機能解析を予定している。
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Research Products
(11 results)
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[Journal Article] Lectin-mediated resistance impairs plant virus infection at the cellular level2012
Author(s)
Yamaji Y., Maejima K., Komatsu K., Shiraishi T., Okano Y., Himeno M., Sugawara K., Neriya Y., Minato N., Miura C., Hashimoto M., Namba S.
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Journal Title
Plant Cell
Volume: 24
Pages: 778-793
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Cloning, expression analysis and sequence diversity of genes encoding two different immunodominant membrane proteins in poinsettia branch-inducing phytoplasma (PoiBI)2011
Author(s)
Neriya Y., Sugawara K., Maejima K., Hashimoto M., Komatsu K., Minato N., Miura C., Kakizawa S., Yamaji Y., Oshima K., Namba S.
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Journal Title
FEMS Microbiology Letters
Volume: 324
Pages: 38-47
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] New detection systems of bacteria using highly selective media designed by SMART : Selective Medium-Design Algorithm Restricted by Two constraints2011
Author(s)
Kawanishi T., Shiraishi T., Okano Y., Sugawara K., Hashimoto M., Maejima K., Komatsu K., Kakizawa S., Yamaji Y., Hamamoto H., Oshima K., Namba S.
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Journal Title
PLoS ONE
Volume: 6(1)
Pages: e16512
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] A necrosis-inducing elicitor domain encoded by both symptomatic and asymptomatic Plantago asiatica mosaic virus isolates, whose expression is modulated by virus replication2011
Author(s)
Komatsu K., Hashimoto M., Maejima K., Shiraishi T., Neriya Y., Miura C., Minato N., Okano Y., Sugawara K., Yamaji Y., Namba S.
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Journal Title
Molecular Plant-Microbe Interactions
Volume: 24
Pages: 408-420
DOI
Peer Reviewed
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