2000 Fiscal Year Annual Research Report
変異プリオン蛋白のプリオン増殖抑制効果とその遺伝子治療への応用
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12050204
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
村本 環 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (40302096)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
北本 哲之 東北大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (20192560)
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| Keywords | プリオン / コンフォメーション / 変異 / バイオアッセイ / 遺伝子治療 / 神経変性 / トランスジェニックマウス |
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| Research Abstract |
最もN末端寄りのhelixを欠損した変異プリオン蛋白(PrPdelH)を発現するTgマウスへの接種実験では、野生型マウスPrP(MoPrP)を欠損しPrPdelHのみを発現するTgマウスの場合、発症が認められず、PrPdelHは感染型に変換されない可能性が高い。PrPdelHとヒト・マウスキメラPrPの両者を発現するマウスにヒトプリオンを接種した場合、ヒト・マウスキメラPrP単独を発現するマウスの場合と比較して潜伏期間の延長が認められ、PrPdelHはヒト・マウスキメラPrPによるヒトプリオンの伝搬に対しても抑制的に働くことが明らかとなった。すなわち、PrPdelHによるプリオン増殖抑制効果は、プリオン増殖に関する「種の壁」を越えて働きうることが示された。
プリオン感染培養細胞の系においても、PrPdelHは野生型プリオン蛋白の構造変換を抑制した。この効果はPrPdelHのC末端GPI付加シグナルを除去すると失われ、抑制効果にはGPIアンカー構造が必要であることが明らかとなった。PrPdelHと野生型PrPの分子間相互作用を解析するため、野生型PrPの構造変換、およびPrPdelHの抑制効果を妨げないで分子に付加しうるエピトープタグの開発を行い、改良型FLAGおよび或る種のウイルス蛋白抗原に対するモノクローナル抗体のエピトープがタグとして有用であることが明らかとなった。一方、PrPdelHに加えて、PrPのN末端の種々の部位に小欠損を持つ変異分子が野生型プリオン蛋白の構造変換を抑制することが示された。
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[Publications] Muramoto T,Tanaka T,Kitamoto N, et al.: "Analyses of Gerstmann-Straussler syndrome with 102Leu219Lys using monoclonal antibodies that specifically detect human prion protein with 219Glu"Neuroscience Letters. 288(3). 179-182 (2000)
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[Publications] Supattapone S,Muramoto T,Legname G, et al.: "Identification of two prion protein regions that modify scrapie incubation time"Journal of Virology. 75(3). 1408-1413 (2001)
