脂質修飾による免疫レセプター・シグナリングの制御機構の解析

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12051228
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 小杉 厚 大阪大学, 医学部, 助教授 (90186685)
• Keywords: T細胞 / TCRシグナル伝達 / Lipid Raft / Lck / Fyn / Cbp

Research Abstract

T細胞に発現するsrc型チロシンキナーゼ、Lck及びFynは転写後脂質修飾を受け、この脂質修飾によって脂質マイクロドメイン(Lipid Raft)に局在することが知られている。研究代表者は数年前よりRaftに注目し、Raftは効率のよいTCRシグナル伝達を誘導するためのcompartmentとなっていることを報告してきた。本研究では、T細胞のRaftに局在するsrc型チロシンキナーゼの機能をさらに詳細に解析した。
Lckは通常の細胞膜にもRaftにも存在するが、この異なった場所に局在するLckの機能的差異は不明である。そこで、通常膜に存在するLckとRaftに存在するLckではどちらがキナーゼ活性が強いのかを検討した。その結果、Lck分子そのものは圧倒的にRaftに多いにもかかわらず、Lckのキナーゼ活性は大部分Raft以外の通常膜に検出された。一方、Fynのキナーゼ活性はLckとは対照的にほとんどRaftに検出されることが判明した。最近、src型チロシンキナーゼの活性を抑制するキナーゼ・Cskと結合するアダプター分子・Cbpが同定され、これがRaftに局在することが報告された。本研究の結果から、RaftのCbpをリン酸化しているのはFynであることが示唆される。この可能性を検証するために、FynノックアウトマウスにおいてCbpがリン酸化されているかどうかを検討した。その結果、予想通りFynノックアウトマウスのT細胞ではCbpのリン酸化が著明に抑制されていることが明らかとなった。Fynによってリン酸化されたCbpは、一定量のCskをRaftに移動させ、このCskの働きによってRaftでのLckの働きを抑制し、刺激前のT細胞にシグナルが入るのを防いでいるものと考えられた。

Research Products

• [Publications] Tasuda K. et al.: "Serine 6 of LCK tyrosine kinase : a critical site for Lck myristoylation, membrane localization, and function in T lymphocytes."J.Immunol.. 165. 3226-3231 (2000)
• [Publications] Umeda Y. et al.: "Non-viral gene gun-mediated CTLA4-Ig gene transfer for modification of donor organs"Transplantation Proc.. 33. 243-245 (2001)
• [Publications] Kosugi A. et al.: "A pivotal role of cysteine 3 of Lck tyrosine kinase for localization to glycolipid enriched microdomains and T cell activation"Immunology Letter. 7612. 133-138 (2001)
• [Publications] Fujimoto H. et al.: "Down-regulation of α6 integrity, an antioncogene product, by functional cooperation of H-Ras and c-Myc"Genes to Cells. (in press).