2000 Fiscal Year Annual Research Report
B細胞分化・多様化を制御する抗原受容体シグナルにおけるBASH/BLNKの役割
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12051238
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| Research Institution | Tokyo University of Science |
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Principal Investigator |
北村 大介 東京理科大学, 生命科学研究所, 教授 (70204914)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
林 克彦 東京理科大学, 生命科学研究所, 助手 (20287486)
岡本 憲明 東京理科大学, 生命科学研究所, 助手 (10318230)
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| Keywords | B細胞抗原受容体 / シグナル伝達 / B細胞分化 / BASH / BLNK / レセプターエディティング / アポトーシス / 対立遺伝子排除 / HPK1 |
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| Research Abstract |
B細胞特異的アダプターBASH/BLNKを欠損するマウスを作製し解析したところ、キメラマウスの解析結果と一致して、成熟B細胞の減少、BCR刺激に対する低反応、腹腔B1細胞の欠如、抗体産生低下、骨髄大型プレB細胞の蓄積などがみられた。脾臓B細胞のL鎖は、正常では約6%がλ鎖陽性であったが、BASH-/-B細胞では約1-2%にすぎなかった。また、κ鎖遺伝子のRS組換えがBASH-/-B細胞では減少していた。これより、BASH-/-B細胞は分化過程でreceptor editingを起こす頻度が低下していると考えられた。従って、BASH-/-マウスでは自己抗原に対するトレランスが不十分である可能性がある。一方、IgH a/b両アレルを有するBASH-/-マウスを作製して、H鎖対立遺伝子排除を調べたが、両アレルを同時に発現するB細胞は骨髄にも脾臓にもなく、H鎖対立遺伝子排除は正常であった。また、BASH-/-未熟B細胞は正常B細胞と比べて培養中にアポトーシスを起こしやすかった。以上の結果より、BASHは1)骨髄未熟B細胞において自己抗原認識によって誘導されるreceptor editing、2)末梢B細胞の定常状態での生存、を誘導するBCRからのシグナル伝達に重要であるが、H鎖対立遺伝子排除を誘導するpreBCRシグナル伝達には必要でないことが新たに明らかになった。
BASHのC末端に位置するSH2ドメインの機能を理解するために、SH2ドメインに結合する蛋白を探索した。その結果、BCR刺激後チロシンリン酸化されたHPK1が直接このSH2ドメインに結合することを見出した。HPK1はMAP4Kに属するSer/Thrキナーゼで、造血系細胞に選択的に発現するが、その役割は不明であった。さらに我々は、BCR刺激によりHPK1キナーゼ活性が誘導され、この活性化にはBASHのSH2ドメインとの結合が必要であることを明らかにした。
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[Publications] 林克彦: "The Bcell-restricted adaptor BASH is required for normal development and antigen receptor-mediated activation of B cells."Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 97・6. 2755-2760 (2000)
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[Publications] 後飯塚僚: "A BASH/ALP-76-related adaptor protein MIST/Clnk involved in IgE receptor-mediated mast cell degranulation"International Immunology. 12・4. 573-580 (2000)
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[Publications] 房木ノエミ: "BLNK is associated with the CD72/SHP-1/Grb2 complex in the WEH1231 cell line agter membrane IgM-cross-linking"Eur.J.Immunol.. 30. 1326-1330 (2000)
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[Publications] 守村敏史: "Cell cycle arrest and apoptosis induced by Notch1 in B cells"J.Biol.Chem,. 275・47. 36523-36531 (2000)
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[Publications] 守村敏史: "Notch signaling suppresses IgH gene expression in chicken B Cells implication in spatially restricted expression of Serrate 2/Notch1"J.Immunol.. 166・5. 3277-3283 (2001)
