2001 Fiscal Year Annual Research Report

ウイルスに対する宿主の低抗性の分子機構

Research Project

Project/Area Number	12052222
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	奥野哲郎京都大学, 農学研究科, 教授 (00221151)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	渡辺雄一郎東京大学, 大学院・総合文化研究所, 助教授 (60183125)
Keywords	トバモウイルス / 植物RNAウイルス / 原形質連絡 / 複製酵素 / 移行タンパク質 / RNA複製 / 細胞間移行 / ジーンサイレンシング
Research Abstract	プラスセンスRNAをゲノムに持つウイルスの植物への全身感染は、ウイルス因子と宿主因子の密接な相互作用によって起こり、植物の抵抗性とウイルスの積極的な侵略を反映していることが明らかになりつつある。本研究では、これらの過程に関与するウイルス因子と植物因子の役割を抵抗性と侵略の両観点から明らかにすることを目的とする。 Nicotiana benthamianaのphytoene desaturase(PDS)、ribulose bisphosphate carboxylase(rbsc)およびtom1遺伝子ホモローグのcDNAそれぞれ約400-700塩基を挿入したキメラPVXベクターをN.benthamianaに接種し、PTGSを誘導することに成功した。これらの植物にToMVを接種すると、tom1の発現が抑制された植物では、チャレンジ接種したToMV感染による病徴の軽減が認められた。すなわち、PTGSにより様々な遺伝子をノックアウトすることによりウイルスの感染に影響を及ぼす宿主遺伝子を同定できる系ができた。一方、ウイルスの細胞間移行機構の研究では、原形質連絡(PD)を構成する分子種について調べる目的で、構成的にToMVのMPを合成している植物をもちいて生化学的に原形質連絡に富む画分の調製を行った。電子顕微鏡観察によってオルガネラの夾雑物もないきれいな細胞壁がえられ、その中に原形質連絡が確認できた。高塩濃度溶液で洗うと、その画分からMPが徐々に溶出することが確認された。その溶出画分にはMPが確認でき、この中にMPと結合するタンパク質の候補があると考えられた。量的に主要な宿主タンパク質としてgermin like proteinを同定した。さらにこの画分にファーウエスタン法によってMPと結合する性質を持つタンパク質の存在を示すデータが得られた。複製酵素が細胞間移行にも対応していることが明らかとなった。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] H.Mizumoto: "The 3'-Untranslated Region of RNA1 as a Primary Determinant of Temperature Sensitivity of Red clover necrotic mosaic virus Canadian Strain"Virology. 293. 320-327 (2002)
[Publications] Tri, A.Damayanti: "Positional Effect of Deletions on Viability, Especially on Encapsidation, of Brome mosaic virus D-RNA in Barley Protoplasts"Virology. 293. 314-319 (2002)
[Publications] H.Hamada: "Amino Acid Changes in Pepper mild mottle virus Coat Protein that Affect the L^3 Gene-mediated Resistance in Pepper"Journal of General Plant Pathology. 68(未定). (2002)
[Publications] H.Nagano: "Conversion in the Requirement of Coat Protein in Cell-to-Cell Movement Mediated by the Cucumber Mosaic Virus Movement Protein"Jurnal of Virology. 75. 8045-8053 (2001)
[Publications] K.Dohi: "Brome Mosaic Virus Replicase Proteins Localize with the Movement Protein at Infection-Specific Cytoplasmic Inclusions at Infected Barley Leaf Cells"Archives of Virology. 146. 1607-1615 (2001)
[Publications] K.Hirashima: "Tobamovirus Replicase Coding Region is Involved in Cell-to-Cell Movement"Journal of Virology. 75. 8831-8836 (2001)

2001 Fiscal Year Annual Research Report

ウイルスに対する宿主の低抗性の分子機構

Principal Investigator

奥野 哲郎 京都大学, 農学研究科, 教授 (00221151)

Research Products

[Publications] H.Mizumoto: "The 3'-Untranslated Region of RNA1 as a Primary Determinant of Temperature Sensitivity of Red clover necrotic mosaic virus Canadian Strain"Virology. 293. 320-327 (2002)

[Publications] Tri, A.Damayanti: "Positional Effect of Deletions on Viability, Especially on Encapsidation, of Brome mosaic virus D-RNA in Barley Protoplasts"Virology. 293. 314-319 (2002)

[Publications] H.Hamada: "Amino Acid Changes in Pepper mild mottle virus Coat Protein that Affect the L^3 Gene-mediated Resistance in Pepper"Journal of General Plant Pathology. 68(未定). (2002)

[Publications] H.Nagano: "Conversion in the Requirement of Coat Protein in Cell-to-Cell Movement Mediated by the Cucumber Mosaic Virus Movement Protein"Jurnal of Virology. 75. 8045-8053 (2001)

[Publications] K.Dohi: "Brome Mosaic Virus Replicase Proteins Localize with the Movement Protein at Infection-Specific Cytoplasmic Inclusions at Infected Barley Leaf Cells"Archives of Virology. 146. 1607-1615 (2001)

[Publications] K.Hirashima: "Tobamovirus Replicase Coding Region is Involved in Cell-to-Cell Movement"Journal of Virology. 75. 8831-8836 (2001)

奥野哲郎京都大学, 農学研究科, 教授 (00221151)