2000 Fiscal Year Annual Research Report

c-Srcリン酸化を介する転写因子NF-κBの活性化と骨吸収の制御

Research Project

Project/Area Number	12137205
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (B)
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	米田俊之大阪大学, 歯学研究科, 教授 (80142313)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	平賀徹大阪大学, 歯学研究科, 助手 (70322170) 西村理行大阪大学, 歯学研究科, 助教授 (60294112)
Keywords	破骨細胞 / c-Src / Chk / Csk / アクチン
Research Abstract	1.Chk遺伝子のクローニングと組織での発現ヒト破骨細胞cDNAライブラリーからCskと約50%の相同性を有するChk遺伝子をクローニングした。ウエスタンプロティングにより,Cskは組織広汎性に発現しているのに対し,Chkの発現は脳,脾臓および破骨細胞に限局していることが判明した。 2.破骨細胞におけるChkの局在とアクチンリング形成免疫組織学的検索により正常マウスの破骨細胞においては,Chkはc-Srcの発現に一致して,破骨細胞膜上の波状縁に局在性に発現されていることが明らかとなった。しかしc-Src欠損マウスの破骨細胞では,Chkは細胞質に散在し,破骨細胞の波状縁形成の指標であるアクチンリングの形成が著しく阻害されていた。 3.Chkによるc-Src抑制作用 ChkはCskと同様にc-Srcのチロシン残基527を特異的にリン酸化し,c-SrcTKを不活化した。CskノックアウトマウスからCskおよびChkを欠失し,c-SrcTKが恒常的に活性化されている細胞株を樹立した。この細胞にChk遺伝子を導入したところ,c-Srcの活性化が著明に阻害されると同時に,アクチンフィラメントの凝集,およびc-SrcTKの特異的基質であり,かつアクチンフィラメント凝集に関わる細胞質内分子であるcortactinの活性化が抑制された。 4.破骨細胞のアクチンリング形成に対するChkの効果破骨細胞におけるChkの生物学的役割を検討するために,Chk遺伝子を組み込んだアデノウイルスを作成し,マウス破骨細胞に導入した。コントロール遺伝子を含むウイルスを導入された破骨細胞は正常のアクチンリングを形成したが,Chk遺伝子を含むウイルスを導入された破骨細胞ではアクチンリングの形成が強く阻害された。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Ji X et al.: "Patterns of gene expression associated with BMP-2-induced osteoblast and adipocyte differentlation of mesenchymal progenitor cell 3T3-F442A"J Bone Miner Met. 18. 132-139 (2000)
[Publications] Y Takaoka et al.: "The pancreas : A storehouse of protein anabolic factors and bone/calcium metabolism-regulating factors."J Bone Miner Met. 18. 2-8 (2000)
[Publications] Toshiyuki Yoneda et al.: "Cellular and molecular basis of preferential metastasis of breast cancer to bone."J Orthop Sci. 5. 75-81 (2000)
[Publications] Michigami T et al: "Cell-cell contact between marrow stromal cells and myeloma cells via VCAM-1 andα4β1 integrin enhances production of osteoclast-stimulating activity in culture"Blood. 96. 1953-60 (2000)
[Publications] Marzia M et al: "Decreased c-Src expression enhances osteoblast differentiation and bone formation"J Cell Biol. 151. 311-20 (2000)
[Publications] Lai CF et al: "Transforming Growth Factor-beta Up-regulates the beta 5 Integrin Subunit Expression via Sp1 and Smad Signaling."J Biol Chem. 275. 36400-36406 (2000)
[Publications] Yoneda T et al: "Actions of bisphosphonate on bone metastasis in animal models of breast cancer."Cancer. 88. 2979-2988 (2000)
[Publications] Yoneda T et al: "A Bone-Seeking Clone Exhibits Different Biological Properties from the MDA-MB-231 Parental Human Breast Cancer Cells and a Brain-seeking Clone in Vivo and in Vitro"J Bone Miner Res. (印刷中). (2001)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

c-Srcリン酸化を介する転写因子NF-κBの活性化と骨吸収の制御

Principal Investigator

米田 俊之 大阪大学, 歯学研究科, 教授 (80142313)

Research Products

[Publications] Ji X et al.: "Patterns of gene expression associated with BMP-2-induced osteoblast and adipocyte differentlation of mesenchymal progenitor cell 3T3-F442A"J Bone Miner Met. 18. 132-139 (2000)

[Publications] Y Takaoka et al.: "The pancreas : A storehouse of protein anabolic factors and bone/calcium metabolism-regulating factors."J Bone Miner Met. 18. 2-8 (2000)

[Publications] Toshiyuki Yoneda et al.: "Cellular and molecular basis of preferential metastasis of breast cancer to bone."J Orthop Sci. 5. 75-81 (2000)

[Publications] Michigami T et al: "Cell-cell contact between marrow stromal cells and myeloma cells via VCAM-1 andα4β1 integrin enhances production of osteoclast-stimulating activity in culture"Blood. 96. 1953-60 (2000)

[Publications] Marzia M et al: "Decreased c-Src expression enhances osteoblast differentiation and bone formation"J Cell Biol. 151. 311-20 (2000)

[Publications] Lai CF et al: "Transforming Growth Factor-beta Up-regulates the beta 5 Integrin Subunit Expression via Sp1 and Smad Signaling."J Biol Chem. 275. 36400-36406 (2000)

[Publications] Yoneda T et al: "Actions of bisphosphonate on bone metastasis in animal models of breast cancer."Cancer. 88. 2979-2988 (2000)

[Publications] Yoneda T et al: "A Bone-Seeking Clone Exhibits Different Biological Properties from the MDA-MB-231 Parental Human Breast Cancer Cells and a Brain-seeking Clone in Vivo and in Vitro"J Bone Miner Res. (印刷中). (2001)

米田俊之大阪大学, 歯学研究科, 教授 (80142313)