2002 Fiscal Year Annual Research Report
マスト細胞の分化とアラキドン酸代謝酵素群の発現調節
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12139206
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| Research Institution | Showa University |
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Principal Investigator |
村上 誠 昭和大学, 薬学部, 助教授 (60276607)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
工藤 一郎 昭和大学, 薬学部, 教授 (30134612)
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| Keywords | マスト細胞 / NDRG1 / PYPAF-1 / SCF / リン酸化 / Hsc70 |
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| Research Abstract |
マウス骨髄由来培養マスト細胞をSCF存在下繊維芽細胞と数日間共培養することにより結合組織型マスト細胞に分化成熟させる簡便な系を確立し、この成熟過程で発現が誘導される分子として、従来マスト細胞で報告のない二種の分子、NDRG1とMMIG-1を同定し、解析を進めている。
NDRG1:昨年度に、NDRG1がラット皮膚マスト細胞に発現していること、マスト細胞活性化に伴い細胞質から核に移行すること、マスト細胞株RBL-2H3に強制発現させると脱顆粒反応の亢進が起こることを報告した。本年度はNDRG1のマスト細胞における機能を明らかにすべく、NDRG1のリン酸化と相互作用因子の同定を試みた。RBL-2H3細胞においてNDRG1はセリン残基が構成的にリン酸化されており、抗原刺激に伴ってリン酸化が一過的に亢進した。NDRG1をリン酸化するキナーゼとして、protein kinase AとCa/calmodulin kinase IIを同定した。また、Yeast two hybrid法と免疫沈降法により、NDRG1がマスト細胞内でHsc70と構成的に結合していることを見い出した。現在、このリン酸化及びHsc70との結合の意義について検討中である。更に、NDRG1欠損マウスの解析を開始している。
MMIG-1:昨年度に、Pyrin, NBD, LRRドメインからなる新規細胞質蛋白、MMIG-1の構造決定を報告した。この分子はごく最近報告されたヒトPYPAF1のマウスホモログと考えられた。PYPAF-1は免疫、炎症、細胞死のシグナル分子と考えられ、マスト細胞の機能にも重大な影響を与えることが予想された。PYPAF1の遺伝子変異が寒冷蕁麻疹の原因となることから、現在これに相当する変異をMMIG-1に導入し、天然型MMIG-1と共に、マスト細胞の成熟・活性化に及ぼす効果を検討中である。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Murakami, M., et al.: "Cellular arachidonate-releasing function and inflammation-associated expression of group IIF secretory phospholipase A2"J.Biol.Chem. 277. 19145-19155 (2002)
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[Publications] Murakami, M., et al.: "Arachidonate release and eicosanoid generation by group IIE phospholipase A2"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 292. 689-696 (2002)
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[Publications] Takamiya, R., et al.: "Stabilization of mast cells by heme oxygenase-1 : an anti-inflammatory role"Am.J.Pathol.. 283. H681-H870 (2002)
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[Publications] Murakami, M., et al.: "Group IID heparin-binding secretory phospholipase A2 is expressed in human colon carcinoma cells and human mast cells and upregulated in mouse inflammatory tissues"Eur.J.Biochem.. 269. 2698-2707 (2002)
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[Publications] Naraba, H., et al.: "Transcriptional regulation of the membrane-associated prostaglandin E2 synthase gene: esential role of the transcription factor EGR-1"J.Biol.Chem. 277. 28601-28608 (2002)
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[Publications] Taketomi, Y., et al.: "Histamine Research in the New Millennium"Yanai, K. et al.. 427-428 (2001)
