2003 Fiscal Year Annual Research Report

セラミド・シグナル調節による細胞死誘導機構の解明とその臨床的意義

Research Project

Project/Area Number	12140203
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	岡崎俊朗京都大学, 医学研究科, 講師 (40233308)
Keywords	SM合成酵素 / SM合成遺伝子 / PI-3キナーゼ / ATMキナーゼ / セラミド / セラミド結合蛋白
Research Abstract	(1)新規トランスフェクション法によるSM合成酵素遺伝子のクローニングとその機能解析 SM合成酵素を欠損したミュータント細胞であるWR19L・SM(-)細胞に対して、ヒトHela細胞のcDNAライブラリィをレトロウィルスをベクターとしたトランスフェクション法を用いて遺伝子導入した。導入された遺伝子ライブラリィ内でSM合成活性を発現した細胞のみ、メチルβサイクロデキストリンによるセレクション法で生存が可能なことを利用して、SM合成遺伝子を発現クローニングした。同定した遺伝子は423アミノ酸をコードしており、SM合成活性のないWR19L・SM(-)細胞に導入したところ、SM合成能を回復することが可能になった。このことより、この遺伝子をSM合成の責任遺伝子とし、SMS1と名付けた。SMS1を発現したWR19L・SMS1細胞は、WR19L・SM(-)細胞に比べて、SM不含有の培地中では細胞増殖速度が速く、細胞膜表面のSMの有無が細胞の有無の増殖に非常に重要であることが判明した。 (2)セラミド結合蛋白(CBP)の同定とその遺伝子クローニングセラミド結合蛋白(CBP)のモチーフとして、PI-3キナーゼを検索していたが、この分子と相同性の高いATMキナーゼの調節因子である脱リン酸化酵素(PP)とセラミドの結合が示唆された。今後、このPPがセラミド結合蛋白(CBP)としての性質を必要十分に備えているかについて検討を進める。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Obuse C., Okazaki T.et al.: "Proteomics analysis of the centromere complex from HeLa interphase cells : UV-damaged DNA binding protein 1 (DDB-1) is a component of the CEN-complex, while BMI-1 is transiently co-localized with the centromeric region in interphase"Genes Cells.. 9(2). 105-120 (2004)
[Publications] Watanabe M., Okazaki T.et al.: "Increase of nuclear ceramide through caspase-3-dependent regulation of the "sphingomyelin cycle" in Fas-induced apoptosis."Cancer Res.. 64(3). 1000-1007 (2004)
[Publications] Okazaki T,. Laali KK.: "Carbocations (M + H)(+) and oxidation dications (M(2+)) from benzo[a]pyrene and its nonalternant isomers azulenophenalenes : a theoretical(DFT, GIAO, NICS) study."J Org Chem.. 69(2). 510-516 (2004)
[Publications] Okazaki T., Kohno S., et al.: "Neuroblastoma detected by mass screening : the Tumor Board's role in its treatment."Pediatr Surg Int.. 20(1). 27-32 (2004)
[Publications] Kobayashi H., Okazaki T.et al.: "Increased levels of circulating adhesion molecules in neonates with congenital diaphragmatic hernia complicated by persistent pulmonary hypertension."Pediatr Surg Int.. 20(1). 19-23 (2004)
[Publications] Iyoda K., Okazaki T.et al.: "The prospective study of vaccines for children following febrile seizures--a questionnaire survey in Hiroshima prefecture"No To Hattatsu.. 35(6). 532-534 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

セラミド・シグナル調節による細胞死誘導機構の解明とその臨床的意義

Principal Investigator

岡崎 俊朗 京都大学, 医学研究科, 講師 (40233308)

Research Products

[Publications] Watanabe M., Okazaki T.et al.: "Increase of nuclear ceramide through caspase-3-dependent regulation of the "sphingomyelin cycle" in Fas-induced apoptosis."Cancer Res.. 64(3). 1000-1007 (2004)

[Publications] Okazaki T,. Laali KK.: "Carbocations (M + H)(+) and oxidation dications (M(2+)) from benzo[a]pyrene and its nonalternant isomers azulenophenalenes : a theoretical(DFT, GIAO, NICS) study."J Org Chem.. 69(2). 510-516 (2004)

[Publications] Okazaki T., Kohno S., et al.: "Neuroblastoma detected by mass screening : the Tumor Board's role in its treatment."Pediatr Surg Int.. 20(1). 27-32 (2004)

[Publications] Kobayashi H., Okazaki T.et al.: "Increased levels of circulating adhesion molecules in neonates with congenital diaphragmatic hernia complicated by persistent pulmonary hypertension."Pediatr Surg Int.. 20(1). 19-23 (2004)

[Publications] Iyoda K., Okazaki T.et al.: "The prospective study of vaccines for children following febrile seizures--a questionnaire survey in Hiroshima prefecture"No To Hattatsu.. 35(6). 532-534 (2003)

岡崎俊朗京都大学, 医学研究科, 講師 (40233308)