2002 Fiscal Year Annual Research Report
転写とヌクレオチド除去修復機構を共役する新規蛋白質複合体の解析
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12143203
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
田中 亀代次 大阪大学, 大学院・生命機能研究科, 教授 (80144450)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉野 雅文 , 助手 (00346149)
倉岡 功 , 助手 (60335396)
西條 将文 , 助教授 (90221986)
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| Keywords | DNA損傷 / DNA修復 / 色素性乾皮症 / コケイン症候群 / ダブルノックアウトマウス / 核マトリクス / 転写 / 小脳失調 |
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| Research Abstract |
我々は、色素性乾皮症A群(XPA)蛋白質と結合する新規蛋白質としてXAB2を単離し、それが「転写と共役したDNA修復」(TCR)機構に関与することを明らかにした。さらに、XAB2を少なくとも6種類のsubunitsからなる複合体としてヒト細胞から精製した。このXAB2複合体はin vitroの転写伸長反応を促進し、RNA polymerase IIのnatural pausing siteでの転写阻害を抑制する活性を持つことを見いだした。一方、コケイン症候群はTCR機構を選択的に欠損するヒト遺伝疾患であり、CS蛋白質がTCR機構に関与することが示唆される。我々は、紫外線照射や過酸化水素処理を受けた正常細胞ではコケイン症候群A群(CSA)蛋白質が核マトリクスに移行し、RNA polymerase IIと共局在することを明らかにした。しかも、コケイン症候群B群細胞ではその移行が選択的に欠損していることを見いだした。この結果はCSA蛋白質の核マトリクスへの移行がTCR機構に関連した現象であることを示唆する。CSA蛋白質のさらなる機能解析のため、HeLa細胞からCSA蛋白質複合体を精製し、質量分析法によりこれらのCSA蛋白質複合体のsubunitsを同定した。他方、XPA欠損マウスとCSB欠損マウスを交配して得られたXPA/CSBダブル欠損マウスは、生後まもなくより運動失調等を示し、生後20日で死亡することを明らかにした。小脳の発育異常、とくに、外顆粒層における細胞増殖の低下とアポトーシス上昇が認められた。XPAやCSB遺伝子が脳の発育に重要な働きを持つこと、それらは異なる作用機序によることを示唆した。
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[Publications] Minoru Ichikawa: "Decreased UV sensitivity, mismatch repair activity and abnormal cell cycle checkpoints in skin cancer cell lines derived from UVB-irradiated XPA-deficient mice"Mutation Research. 459. 285-298 (2000)
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[Publications] Yoshimichi Nakatsu: "XAB2, a novel tetratricopeptide repeat protein, involved in transcription-coupled DNA repair and transcription"J.Biol.Chem.. 275. 34931-34937 (2000)
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[Publications] Masahiko Nitta: "A novel cytoplasmic GTPase XAB1 interacts with DNA repair protein XPA"Nucleic Acid Research. 28. 4212-4218 (2000)
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[Publications] Machiko Murai: "Early postnatal ataxia and abnormal cerebellar development in mice lacking xeroderma pigmentosum group A and the Cockayne syndrome group B DNA repair genes"Proc.Natl.Acad.Sci., USA. 98. 13379-13384 (2001)
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[Publications] Shinya Kamiuchi: "Translocation of Cockayne syndrome group A protein to the nuclear matrix : possible relevance to transcription-coupled DNA repair"Proc.Natl.Acad.Sci., USA. 99. 201-206 (2002)
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[Publications] Masafumi Yoshino: "Additive roles of XPA and MSH2 genes in UVB-induced skin tumorigenesis in mice"DNA Repair. 1. 935-940 (2002)
