XPG欠損マウスを用いたヌクレオチド除去修復と塩基除去修復の相互作用の解析

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12143208
• Research Institution: National Institute of Radiological Sciences
• Principal Investigator: 塩見 忠博 放射線医学総合研究所, 低線量生体影響プロジェクト, 研究員 (40162573)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 森 雅彦 放射線医学総合研究所, 放射線障害研究グループ, 研究員 (30270614) ; 高萩 真彦 放射線医学総合研究所, 低線量生体影響プロジェクト, 研究員 (30260235)
• Keywords: 色素性乾皮症G群 / 疾患モデルマウス / ヌクレオチド除去修復 / 塩基除去修復 / 早期死亡 / 老化

Research Abstract

色素性乾皮症(XP)G群患者でCSを併発する患者のXPG遺伝子の突然変異が調べられており、これらの患者すべてにXPG蛋白のC末を欠損する変異が見つかっている。XPG蛋白と出芽酵母のホモログRad2蛋白を比較すると、C末(Rad2のC末に相当する部位)にも顕著な相同性(C領域、約34%が同一アミノ酸)が保存されていることからCS発症に関連する重要な生体機能を担っているものと推定される。そこで、C末欠損とCS発症との関係を調べるため、C末欠損変異を導入した2系統のXpg変異マウスを作製した。1系統は、エクソン15を欠損した系統で、XpgΔex15と名付け、もう1系統は、Xpgの811番目のアミノ酸(アスパラギン酸)をストップコドンに置き換えた系統でXpgD811stopと名付けた。XpgΔex15はXpgのC末183アミノ酸を欠損しC領域の大部分を残しており、XpgD811stopはC末360アミノ酸を欠損しC領域全てを失っている。これらの変異をホモに持つマウスを作出し、これらマウスの成長並びに生存期間を測定した。XpgΔex15ホモマウスは、誕生後の成長及び生存期間は野生型マウスと遜色が認められず、CS発症の兆候は認められなかった。一方、XpgD811stopホモマウスは誕生後明らかな成長阻害がみられ大部分(24匹中22匹)が30日以内に死亡した。残り2匹のマウスも明らかな成長阻害が認められ誕生後78日目と139日目に死亡した。このようにC末欠損ではなく、C領域欠損の有無とCS発症が密接な関係にあることが明らかになった。

Research Products

• [Publications] N.Shiomi, S.Kito, M.Oyama, T.Matsunaga, Y-N.Harada, M.Ikawa, M.Okabe, T.Shiomi: "Identification of the XPG region that causes onset of Cockayne syndrome using Xpg mutant mice generated by the cDNA-mediated knock-in method"Molecular and Cellular Biology. 24(9)(In press). (2004)
• [Publications] Seiji Kito, Yoshiko Noguchi, Yuki Ohta, Tatsuya Ohhata1, Masumi Abe, Naoko Shiomi, Tadahiro Shiomi: "Evaluation of Developmental Competence of Vitrified-warmed Early Cleavage Stage Embryos and their Application for Chimeric Mouse Production."Exp.Anim.. 52. 179-183 (2003)