体節中胚葉の増殖と初期分化

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12145201
• Research Institution: Okazaki National Research Institutes
• Principal Investigator: 高田 慎治 岡崎国立共同研究機構, 統合バイオサイエンスセンター, 教授 (60206753)
• Keywords: 体節 / 中胚葉 / ゼブラフィッシュ / モルフォリノアンチセンスRNA / Wnt

Research Abstract

体節前駆細胞の形成、維持の仕組みを理解するためには、その供給源となる幹細胞の増殖能ならびに体節前駆細胞への分化能が維持される機構を解明しなければならない。これまでの研究から、マウスの初期胚では幹細胞が存在する予定体節形成領域ではWnt-3aが発現し、その機能欠失型変異体では幹細胞が体節前駆細胞に分化する能力を失う代わりに神経上皮細胞へと運命転換し、最終的には新たな神経管を異所的に形成することが明らかになってきた。さらに、Wnt-3aは予定体節形成領域においてephrinA1の発現を制御しており、ephrinA1は予定脊索領域で発現するephrinA1の受容体EphA2との反発作用により、これら2つの領域の境界形成を制御しているものと考えられた。Wntにより引き起こされるこのような現象の分子メカニズムを明らかにするため、本年度は、ゼブラフィッシュを用いて体節前駆細胞に発現する遺伝子の系統的解析を試みた。
体節前駆細胞を多く含む20体節期のゼブラフィッシュ胚の尾芽を材料にcDNAライブラリーを作製し、約4000クローンの発現パターンをin situ hybridization法により調べた結果、そのうちの158クローンが体節前駆細胞で特異的に発現していた。これら各クローンのDNA塩基配列を決定した結果、その中にはこれまで未同定だった遺伝子が数多く含まれていることがわかった。さらに、その機能を解析するためモルフォリノアンチセンスRNAの注入による機能阻害実験を開始した。

Research Products

• [Publications] Yamanaka H 他7名: "JNK functions in the non-canonical Wnt pathway to regulate convergent extension movements in vertebrates"EMBO Rep.. 3. 69-75 (2002)
• [Publications] Muroyama Y 他4名: "Wnt signaling plays an essential role in neuronal specification of the dorsal spinal cord"Genes Dev.. 16. 548-553 (2002)
• [Publications] Ohbayashi, N. 他6名: "Fgf18 is required for cell proliferation and differentiation during osteogenesis and chondrogenesis"Genes Dev.. 16. 870-879 (2002)
• [Publications] Ueda Y 他6名: "Wnt/beta-catenin signaling suppresses apoptosis in low serum medium and induces morphologic change in rodent fibroblasts"Int J Cancer. 99. 681-688 (2002)
• [Publications] Jimbo T 他6名: "Identification of a link between the tumour suppressor APC and the kinesin superfamily"Nat Cell Biol.. 4. 323-327 (2002)