2000 Fiscal Year Annual Research Report
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12202002
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan University |
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Principal Investigator |
相垣 敏郎 東京都立大学, 理学研究科, 助教授 (80150879)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
林 茂生 国立遺伝学研究所, 系統生物センター, 教授 (60183092)
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| Keywords | ショウジョウバエ / ゲノム / 機能獲得変異体 / Gene Searchシステム / 強制発現 / 機能ゲノミクス / エンハンサートラップ |
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| Research Abstract |
ショウジョウバエは真核多細胞生物における遺伝子機能解析系として重要なモデル生物である.全ゲノムの配列が決定された現在,ゲノム規模での遺伝子機能の解明にむけたアプローチが必要である.本研究では,ショウジョウバエゲノムの遺伝子機能を体系的に解明することを目的として,Gene Search(GS)強制発現ベクター挿入系統(計画代表・相垣),およびGAL4エンハンサートラップ系統(計画分担・林)の大規模解析を開始した.
ゲノムの機能情報を取得するには,突然変異体の作製が不可欠である.トランスポゾン挿入変異体では原因遺伝子を特定するには有利であるが,従来の機能喪失変異体の探索を目的にしたベクターでは検出できる表現型に限界がある.また,Pエレメントによるバックグラウンド突然変異があるため,ホモ接合体の表現型は必ずしもベクター挿入の結果ではないこともある.これらの欠点を克服するものとして,本研究では酵母由来GAL4転写活性化因子の標的配列であるUASエンハンサーをPエレメントに組み込んだGene Searchベクターを用いて,大規模な挿入系統の作製を進めた.具体的には,UASエンハンサーをP末端両側に組み込んだもの(GSv1),片側のみに組み込んだものを(GSv2,GSv3),およびGSv1の片側UASの下流にGFPを導入して発現レポーターとしたもの(GSv6)の4種類を用いて,合計5,000のGSベクター挿入系統を樹立した.また,ゲノム上の挿入サイトをマップするために,各ベクターごとにInverse-PCRの最適化を行った.
GSv6ベクターは表現型の誘発頻度はGSv1の1/2であるが,エンハンサートラップの機能があるため,最も効率的にゲノムの情報を取得できる.
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[Publications] Toba,G. and Aigaki,T.: "Disruption of the Microsomal glutathione S-transferase-like gene reduces life span of Drosophila melanogaster."Gene. 253. 179-187 (2000)
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[Publications] Aso,T.,Yamazaki,K.,Aigaki,T.and Kitajima,S.: "Drosophila von Hippel-Lindau Tumor Suppressor Complex possesses E3 ubiquitin ligase activity."Biochm.Biophys.Res.Com.. 276. 355-361 (2000)
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[Publications] Ejima,A.,Nakayama,S.and Aigaki,T.: "Phenotypic association of spontaneous ovulation ana sexual receptivity in virgin females of Drosophila melanogaster."Behavior Genetics. (in press). (2001)
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[Publications] Seong,K.-H.,Ohashiwa,T.,Matsuo,T.,Fuyama,Y.and Aigaki,T.: "An application of the gene search system to a screen for longevity gene in Drosophila."Biogerontology. (in press). (2001)
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[Publications] 相垣敏郎: "ポストゲノムの神経科学-ショウジョウバエの研究から-"脳の科学. 23. 59-63 (2001)
