2002 Fiscal Year Annual Research Report

B型肝炎ウイルスX蛋白の機能

Research Project

Project/Area Number	12213050
Research Institution	Kanazawa University
Principal Investigator	村上清史金沢大学, がん研究所, 教授 (90019878)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	林直之金沢大学, がん研究所, 助手 (50253456)
Keywords	HBVX蛋白 / RNAポリメラーゼ / TFIIF / RAP30 / RMP / テロメラーゼ活性
Research Abstract	B型肝炎ウイルスのX蛋白が、肝細胞がん発症に積極的に関与することが示唆されている。本研究は、HBxが転写を修飾し、宿主の炎症応答や増殖関連遺伝子発現の転写昂進をもたらす分子機構の解明と、HBxのヒト初代細胞の不死化の過程に積極的な関与を解明することを目的としている。本年度は以下の結果を得た。1)HBxの核内標的であるRPB5の中央部は、転写制御因子との接触面を構成し、DNAとの結合能を示す。HBx及びTFIIFのRAP30は、RPB5と結合して、RPB5とDNAの結合に阻害的に働いた。RPB5のDNA結合能に必須なT111及びS113は、HBx及びRAP30とRPB5との結合には影響を与えなかった。2)酵母two hybrid法を用いてHBxの機能的拮抗因子RMPのパートナーとして、DNAメチル化酵素と結合しcorepressor能を示すDMAP1とRMP自体を選択した。In vivo及びin vitro系で、RMPのcoiled-coilドメインがDMAP1結合領域であり、DMAP1はRMPの核局在を促進し、RMPのcorepressor能を協同的に促進した。3)hTERTを抗原として作成した抗hTERT mAbの特異性を確認し、免疫沈降によってhTERTのみならずテロメラーゼ活性を回収できた。このmAbを用いた組織染色でHEp2細胞の内在性hTERTは、主に核小体に局在した。4)部分精製hTERTを用いて、抗hTERT抗体価の免疫的な測定系を構築し、肝炎から肝がんの進展に伴う変化を検討した。その結果、肝がん化に随伴して血清中の抗hTERT自己抗体価の上昇が観察された。他の担がん患者血清でも有意の抗hTERT自己抗体価の上昇が見られた。5)HBxの集約型アラニン置換変異によるHBxの全領域をスキャン可能なライブラリーを作成した。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Qin, W., et al.: "Oligomeric interaction of Hepatitis C Virus NS5B is critical for catalytic activity of RNA dependent RNA polymerase"J.Biol.Chem.. 277. 2132-2137 (2002)
[Publications] Arai, K., et al.: "Two independent regions of human telomerase reverse transcriptase (hTERT) are important for their oligomerization and telomerase activity"J.Biol.Chem.. 277. 8536-8544 (2002)
[Publications] Shirota, Y. et al.: "Hepatitis C Virus NS5A Binds RNA-Dependent RNA Polymerase NS5B and modulates RdRP activity"J.Biol.Chem.. 277. 11149-11155 (2002)
[Publications] Masutomi, K. et al.: "Identification of serum anti_human telomerase reverse transcriptase (hTERT) auto-antibodies during progression to hepatocellular carcinoma"Oncogene. 21. 5946-5950 (2002)
[Publications] Maida, C. et al.: "Direct activation of telomerase by EGF through Ets-mediated transactivation of TERT via MAP kinase signaling pathway"Oncogene. 21. 4071-4079 (2002)
[Publications] Hayashi, N., Murakami, S.: "STM1, a gene which encods a guanine quadruplex binding protein interacts with CDC13 in Saccharomyces cerevisiae"Mol. Genet. Genomics. 267. 806-813 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

B型肝炎ウイルスX蛋白の機能

Principal Investigator

村上 清史 金沢大学, がん研究所, 教授 (90019878)

Research Products

[Publications] Qin, W., et al.: "Oligomeric interaction of Hepatitis C Virus NS5B is critical for catalytic activity of RNA dependent RNA polymerase"J.Biol.Chem.. 277. 2132-2137 (2002)

[Publications] Arai, K., et al.: "Two independent regions of human telomerase reverse transcriptase (hTERT) are important for their oligomerization and telomerase activity"J.Biol.Chem.. 277. 8536-8544 (2002)

[Publications] Shirota, Y. et al.: "Hepatitis C Virus NS5A Binds RNA-Dependent RNA Polymerase NS5B and modulates RdRP activity"J.Biol.Chem.. 277. 11149-11155 (2002)

[Publications] Masutomi, K. et al.: "Identification of serum anti_human telomerase reverse transcriptase (hTERT) auto-antibodies during progression to hepatocellular carcinoma"Oncogene. 21. 5946-5950 (2002)

[Publications] Maida, C. et al.: "Direct activation of telomerase by EGF through Ets-mediated transactivation of TERT via MAP kinase signaling pathway"Oncogene. 21. 4071-4079 (2002)

[Publications] Hayashi, N., Murakami, S.: "STM1, a gene which encods a guanine quadruplex binding protein interacts with CDC13 in Saccharomyces cerevisiae"Mol. Genet. Genomics. 267. 806-813 (2002)

村上清史金沢大学, がん研究所, 教授 (90019878)