2001 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
12213082
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Research Institution | Nara Institute of Science and Technology |
Principal Investigator |
真木 寿治 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 教授 (20199649)
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Keywords | ミューテーター / DNA複製 / DNA修復 / ノックアウトマウス / DNA損傷 / DNAポリメラーゼ / 校正機能 / フレームシフト |
Research Abstract |
複製エラーおよび自然DNA損傷に起因する突然変異の特徴を明らかにし、自然突然変異の真の起源を解明する目的で、rpsL遺伝子部分二倍体大腸菌を用いた新しい変異検出・解析を確立した。この実験系を用いて、野生株、ミスマッチ修復欠損変異株およびバイパスDNA合成欠損変異株の染色体複製で生じる自然突然変異を多数分離し、塩基配列レベルでの体系的な解析を行った。その結果、プラスミドrpsL系で得られた結果と異なる点として以下のことが明らかになった。1)野生株での塩基置換変異に強いホットスポット変異が見いだされ、それらの発生はミスマッチ修復によってほとんど抑制されない。2)染色体複製においては配列置換を引き起こす鋳型スイッチエラーに特異的に働く新規の修復経路が存在することが示唆された。3)野生株では通常の染色体複製においても組換え修復を必要とする複製フォークの進行阻害が高頻度に生じていることが示された。4)野生株での塩基置換の80%以上はバイパスDNA合成に依存して生じており、上記の塩基置換のホットスポットの原因はこれらの部位での自然DNA損傷がバイパスDNA合成により高頻度に変異として固定されることが示唆された。5)一塩基フレームシフトについても少なくともnon-runでの発生はバイパスDNA合成に依存して生じていることが明らかになった。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Yoshiyama, K.: "Directionality of DNA replication fork movement strongly affects the generation of spontaneous mutations in Escherichia coli"J. Mol. Biol.. 307. 1195-1206 (2001)
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[Publications] Umezu, K.: "Structural analysis of aberrant chromosomes that occur spontaneously in diploid Saccharomyces cerevisiae : Retrotransposon Ty1 plays a crucial role in chromosomal rearrangements"Genetics. 160. 97-110 (2002)
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[Publications] Watanabe, K.: "Involvement of RAD9-dependent damage checkpoint control in arrest of cell cycle, induction of cell death, and chromosome instability caused by defects in origin recognition complex in Saccharomyces cerevisiae"Eukaryotic Cell. (In press). (2002)
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[Publications] Sugaya, Y.: "Hyper-processive and slower DNA chain elongation catalyzed by DNA polymerase III holoenzyme purified from tha dnaE173 mutator mutant of Escherichia coli"Genes to Cells. (In press). (2002)
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[Publications] Tsuzuki, T.: "Spontaneous tumorigenesis and mutagenesis in mice defective in the MTH1 gene encoding 8-oxo-dGTPase"Mutation Research. (In Press). (2002)
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[Publications] Ajima, J.: "Eleveted incidence of loss of heterozygosity(LOH) in an sgs1 mutant of Saccharomyces cerevisiae"Mutation Research. (In Press). (2002)