疾患モデルによる多段階発がん研究

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12213139
• Research Institution: Japanese Foundation For Cancer Research
• Principal Investigator: 樋野 興夫 財団法人癌研究会, 癌研究所・実験病理部, 部長 (90127910)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 梅田 知幸 (財)癌研究会, 癌研究所・実験病理部, 研究員 (10286776) ; 梶野 一徳 (財)癌研究会, 癌研究所・実験病理部, 研究員 (80260066)
• Keywords: 起始遺伝子 / 腎発がん / Tsc1遺伝子 / Tsc2遺伝子 / Erc遺伝子 / Niban遺伝子 / 多段階発がん / 疾患モデル

Research Abstract

(1)種々のTsc2遺伝子欠失変異体を導入したTransgenic Eker ratの解析:4種類の変異型Tsc2遺伝子導入Transgenic Eker ratのうちヘテロ接合体の腎発がんの抑制にはC末端Rap1 GAPに相同な部分を含む領域(RGH)のみが必須であることを発見した。ホモ接合体の胎生致死には、興味あることにexon41の関与が示唆された。
(2)Tsc1遺伝子knockout miceとTsc2遺伝子knockout miceの交配にて、興味あることに肝細胞がんが早期に観察された。細胞特異的発がん解明の一つの手がかりになるものと期待される。
(3)Eker rat多段階腎発がん過程で発現してくるErc遺伝子と新規Niban遺伝子のペプチドおよびモノクローナル抗体を作製した。Niban遺伝子産物は、初期病変である変異尿細管から強く、発現が観察された。Erc遺伝子産物は、培養上清および血清に分泌されていることが確認された。そこで診断用のヒトELISA法を確立した。腫瘍マーカーとしての可能性が出てきた。
(4)Erc gene knockout miceの作製を行い(ホモ接合体は生存可能)、腎発がんへの影響を見る為にTsc2遺伝子knockout miceと交配させた。Erc gene knockoutマウスの作製を行った(ホモ接合体は生存可能)。Erc遺伝子とTsc2遺伝子は、同じ染色体(マウス、ラット、ヒトともに)に、しかも極く近接して存在している為に(0/128recombination)、同一alleleにmutantが存在するマウスを得ることは確率的に極めて困難である。しかし、多数の交配を行い、本年度、貴重な一匹を得ることに成功した。このマウスをErc gene knockoutマウスとの交配に用いて、Erc(-/-)&Tsc2(-/+)double knockout miceを作製することにより、Tsc2(-/+)mice単独の腎発がんと比較検討することが可能になった。
(5)IFNγtransgenicマウスとTsc2遺伝子knockoutマウスの交配により腎発がんが抑制された(15/15 vs 0/9)。
(6)新規遺伝性腎がん(Nihon)ratの原因遺伝子マッピングに成功した。

Research Products

• [Publications] Hino, O., Majima, S. et al.: "Multistep renalcarcinogenesis as gene expression disease in tumor suppressor TSC2 gene mutant model-genotype, phenotype and environment"Mutation Res.. 477. 155-164 (2001)
• [Publications] Kobayashi, T., Hino, O. et al.: "A germ-line Tsc1 mutation causes tumor development and embryonic ethality that are similar, but not identical to, those caused by Tsc2 mutation in mice"Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98. 8762-8767 (2001)
• [Publications] Okamoto, T., Hino, O. et al.: "Suppression of cytochrome P450 1A1 and 4A1 gene expression in renal carcinomas of TSC2 gene mutant(Eker) rats"Int. J. Oncology. 18. 147-149 (2001)
• [Publications] Hino, O., Okimoto, k. et al.: "A novel renal carcinoma predisposing gene of the Nihon rat maps on chromosome 10"Jpn. J. Cancer Res.. 92. 1147-1149 (2001)
• [Publications] Sato, T., Hino, O. et al.: "Mutation analysis of the TSC1 and TSC2 genes in Japanese patients with pulmonary lymphangioleiomyomatosis"J. Human Genetics. 47. 20-28 (2002)
• [Publications] Hino, O., Kobayashi, T. et al.: "Prevention of hereditary carcinogenesis"Proc. Japan. Acad.. 78(B). 31-33 (2002)