HIVアクセサリー遺伝子Vprによるゲノム不安定性の分子機構

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12213161
• Research Institution: Research Institute, International Medical Center of Japan
• Principal Investigator: 石坂 幸人 国立国際医療センター, 研究所・難治性疾患研究部, 部長 (30281687)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 志村 まり 国立国際医療センター, 研究所・難治性疾患研究部, 室長 (90226267)
• Keywords: HIV / Vpr / ゲノム不安定性 / ヘテロクロマチン蛋白質 / 染色体

Research Abstract

HIVアクセサリー遺伝子VPRは、細胞周期G2/M期におけるチェックポイント機構の破綻を誘発し、染色体の数の異常を引き起こす。本研究ではVPRによるゲノム不安定性誘発の機序を明らかにすることにより、正常細胞でのゲノム維持機構を明らかにすることを目的としている。VPR発現下での染色体の動きを観察するとlagging chromosomesが誘導されること、またVPRによりウイルスRNAの転写が亢進することから、ヘテロクロマチン蛋白質1(以下HP1)に着目して解析した。その結果、VPRの発現によりHP1がキネトコアから消失していること、またこれに伴って娘染色体の結合を保持するコヘシン(Rad21/SCC1)も消失すること、さらにCENP-Fの染色性も著明に障害されていることを見出した。一方、HP1がクロマチンに結合するために必須なヒストンH3 N-末端9番目のリジン(H3-K9)のメチル化が顕著に阻害され、代わりにアセチル化が亢進していた。またVPRはヒストンアセチル転換酵素であるp300と結合し、VPR抗体を用いて調整した免疫沈降物がH3-K9のアセチル化を誘導することを見出した。さらにこのようなVPRによるHP1の機能障害は、VPRリコンビナント蛋白質を細胞の培養液に添加することによっても誘発された。以上のことから、VPRのエピゲネティックな作用によりHP1の機能が障害されることにより、染色体の分離異常が誘発されていることが示唆された。

Research Products

• [Publications] Mishima Y, Terui Y, Mishima Y, Katsuyama M, Mori M, Tomizuka H, Takizawa T, Miyazato A, Ueda M, Yamada M, Hayasawa H, Mizunuma N, Ishizaka Y, Ikeda K, Kato T, Ozawa K, Hatake K.: "New human myelodysplastic cell line, TER-3 : G-CSF specific downregulation of Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase IV"J Cell Physiol.. 191. 183-190 (2002)
• [Publications] Mishima, T., Mishima, Y., Terui, Y., Katsuyama, M., Yamada, M., Mori, M., Ishizaka, Y., Ikeda, K., Watanabe, J., Mizunuma, N., Hayasawa, H., Hatake, K.Res: "Ristance mechanisms of CD13/Aminopeptidase-Nto apoptosis mediated by endothelial cells"J. Natl. Cancer Inst.. 94. 1020-1028 (2002)
• [Publications] Minemoto, Y., Uchida, S., Ohtsubo, M., Shimura, M., Sasagawa, T., Hirata, M., Nakagama, H., Ishizaka, Y., Yamashita, K: "Loss of p53 Induces M-phase retardation following G2 DNA damage Checkpoint abrogation"Archives of Biochemistry and Biophysics. (in press).