2000 Fiscal Year Annual Research Report
二量体化ライブラリーを用いた増殖・抗アポプトーシス関連遺伝子の単離
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12215028
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
渡辺 すみ子 東京大学, 医科学研究所, 助手 (60240735)
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| Keywords | GM-CSF / 血球細胞 / 二量体化 / DNA gyrase / エストロジェンレセプター |
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| Research Abstract |
本研究ではDNA gyraseあるいはエストロジェンレセプターなどの人為的2量体化システムを用いてライブラリーを作成し、細胞増殖あるいは抗アポプトーシス活性を指標に、2量体化によって活性化を受ける新規分子の単離を目標とした。当初の計画どうりレトロウイルスライブラリーを用いることとし、エストロジェンレセプター、DNA gyraseそれぞれと融合蛋白質となるようなライブラリーを作成し、マウスIL-3依存性株であるBa/F3細胞に導入した。その後IL-3非依存性に増殖するクローン、ガンマ線照射後も生存するクローンを単離し、genomic PCRによりレトロウイルスにより染色体中に導入された遺伝子を単離した。その結果、IL-3非依存的に増殖する株からは融合蛋白質をコードすると思われる配列が見いだされず、IL-3非依存性の増殖はインサーションミュタジェネシスによるものと予想された。一方、ガンマ線照射に対し耐性になる株からはヒストンアセチレース2のマウスホモログが単離された。このものが、ガンマ線照射に対して実際に耐性となるのかどうか検討を加えている。
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[Publications] Harada,Y.: "Cyclic AMP inhibits the activity of c-Jun N-terminal kinase 2 (JNK2) but not JNK1 and ERK2, in human helper T lymphocytes."Biochem. Biophys. Res. Comm.. 266. 129-134 (2000)
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[Publications] Liu,R.: "Signals for prevention of girradiation-induced apoptosis by hGM-CSF."Oncogene. 19. 571-579 (2000)
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[Publications] Dahl,M.E.: "Association of Lyn tyrosine kinase to the GM-CSF and IL-3 receptor common be subunit and role of Src tyrosie kinases in DNA synthesis and anti-apoptosis."Genes to Cells. 5. 143-153 (2000)
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[Publications] Liu,R.: "Antiapoptotic activity of the hGM-CSF receptor."J.Allergy Clin.Immunol.. 106. 10-18 (2000)
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[Publications] Watanabe,S.: "Analysis of signals and functions of the chimeric hGM-CSF receptor in BA/F3 cells and transgenic mice."J.Immunol.. 164. 3653-3644 (2000)
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[Publications] Sato,T.: "Erythroid Progenitors Differentiate and Mature in Response to Endogenous Erythropoietin,"J.Clinical Invest.. 106. 263-270 (2000)
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[Publications] Okubo,T.: "Effect of human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) on lymphoid and myeloid differentiation of sorted hematopoietic stem cells from hGM-CSF receptor gene transgenic mice."J.Biochem.. 127. 591-596 (2000)
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[Publications] Sakurai,Y.: "In vitro analysis of mechanism of STAT5 activation by granulocyte-macrophage colony-stimulating factor."Genes to Cells.. 5. 937-947 (2000)
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[Publications] Watanabe,S.: "Initiation of polyoma virus origin dependent DNA replication through STAT5 activation by human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF)."Blood. (in press).
