2002 Fiscal Year Annual Research Report

低分子量G蛋白質による細胞増殖の制御機構

Research Project

Project/Area Number	12215098
Research Institution	Kobe University
Principal Investigator	片岡徹神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40144472)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	枝松裕紀神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (70335438) 島扶美神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (60335445)
Keywords	低分子量G蛋白質 / ras癌遺伝子 / rap1癌抑制遺伝子 / ホスホリパーゼC / 細胞増殖因子 / X線結晶解析 / RAドメイン / M-Ras
Research Abstract	1、我々が発見した新規Ras/Rap1エフェクター・ホスホリパーゼCε(PLCε)の細胞増殖因子刺激に伴う活性化機構を解明した。血小板由来細胞増殖因子(PDGF)刺激に伴い、RasとRap1の活性化を介して各々即時性と持続性の二相性のPLCεの活性化が観察された。Rap1に対するグアニンヌクレオチド交換促進活性を持つPLCεのCDC25類似ドメインを介したシグナルの自己増幅機構がRap1による持続的活性化に必要であった。Ras/Rap1によるPLCεの活性化は、BaF3細胞に対して増殖促進効果と細胞増殖因子飢餓により誘導されるアポトーシスの抑制効果を示した。マウスでの発現パターンの解析から、PLCεが胎生期に神経幹細胞の神経細胞系列への分化に際して強く発現誘導されることと、成体では心臓に良く発現されていることがわかった。この結果から、PLCεが神経細胞の発生・分化や心臓機能調節に関与する事が示唆された。実際、遺伝子ターゲッティングによりPLCε遺伝子ノックアウトマウスを作製したところ、生後4週令の早期から心臓の拡大と心不全マーカーの過剰発現の表現型が検出された。また、PLCε遺伝子ノックアウトマウスを用いて、発癌イニシエーターDMBAとプロモーターTPAによる皮膚化学発癌実験を行ない、PLCεのRas依存性発癌における機能を個体レベルで解析している。 2、X線結晶解析によるエフェクターのRasファミリー低分子量G蛋白質結合認識機構の構造科学的解析を進め、RA-GEF-2のRas結合(RA)ドメインと特異的に結合するM-Ras(R-Ras3)のGDP, GTP結合型の結晶化を行ない、X線結晶解析による高次構造解明(分解能1.96オングストローム)に成功した。Ras, Rap1の高次構造と比較すると、スイッチII領域の構造が異なっていた。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Chunhua Song, et al.: "Differential roles of Ras and Rap1 in growth factor-dependent activation of phospholipase Cε"Oncogene. 21巻53号. 8105-8113 (2002)
[Publications] Yoshiya Tanaka, et al.: "H-Ras/mitogen-activated protein kinase pathway inhibits integrin mediated adhesion and induces apoptosis in osteoblasts"The Journal of Biological Chemistry. 277巻24号. 21446-21452 (2002)
[Publications] Shinya Mitsuhashi, et al.: "Usage of Tautomycetin, a novel inhibitor of protein phosphatase 1(PP1), reveals that PP1 is a positive regulator of Raf-1 in vivo"The Journal of Biological Chemistry. 278巻1号. 82-88 (2003)
[Publications] Dongmei Wu, et al.: "Neuronal lineage-specific induction of phospholipase Cε expression in the developing mouse brain"European Journal of Neuroscience. (印刷中). (2003)
[Publications] Kayo Hibino, et al.: "Single-and multiple-molecule dynamics of the signaling from H-Ras to c Raf-1 visualized on the plasma membrane of living cells"Chemphyschem. (印刷中). (2003)
[Publications] 佐藤孝哉, 他: "Rasを介するシグナル伝達と癌"Molecular Medicine. 39巻11号. 1238-1246 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

低分子量G蛋白質による細胞増殖の制御機構

Principal Investigator

片岡 徹 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40144472)

Research Products

[Publications] Chunhua Song, et al.: "Differential roles of Ras and Rap1 in growth factor-dependent activation of phospholipase Cε"Oncogene. 21巻53号. 8105-8113 (2002)

[Publications] Yoshiya Tanaka, et al.: "H-Ras/mitogen-activated protein kinase pathway inhibits integrin mediated adhesion and induces apoptosis in osteoblasts"The Journal of Biological Chemistry. 277巻24号. 21446-21452 (2002)

[Publications] Shinya Mitsuhashi, et al.: "Usage of Tautomycetin, a novel inhibitor of protein phosphatase 1(PP1), reveals that PP1 is a positive regulator of Raf-1 in vivo"The Journal of Biological Chemistry. 278巻1号. 82-88 (2003)

[Publications] Dongmei Wu, et al.: "Neuronal lineage-specific induction of phospholipase Cε expression in the developing mouse brain"European Journal of Neuroscience. (印刷中). (2003)

[Publications] Kayo Hibino, et al.: "Single-and multiple-molecule dynamics of the signaling from H-Ras to c Raf-1 visualized on the plasma membrane of living cells"Chemphyschem. (印刷中). (2003)

[Publications] 佐藤 孝哉, 他: "Rasを介するシグナル伝達と癌"Molecular Medicine. 39巻11号. 1238-1246 (2002)

片岡徹神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40144472)

[Publications] 佐藤孝哉, 他: "Rasを介するシグナル伝達と癌"Molecular Medicine. 39巻11号. 1238-1246 (2002)