2003 Fiscal Year Annual Research Report

低分子量G蛋白質による細胞増殖の制御機構

Research Project

Project/Area Number	12215098
Research Institution	Kobe University
Principal Investigator	片岡徹神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40144472)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	枝松裕紀神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (70335438) 島扶美神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (60335445)
Keywords	低分子量G蛋白質 / ras癌遺伝子 / rap1癌抑制遺伝子 / ホスホリパーゼC / 化学発癌 / 心臓半月弁弁膜症 / X線結晶解析 / 細胞内局在
Research Abstract	1 ras癌遺伝子依存性の発癌におけるRasエフェクター・ホスホリパーゼCε (PLCε)の役割を個体レベルで解析するため、PLCε遺伝子ノックアウトマウスを作製し、7,12-dimethylbenzanthracene (DMBA)をイニシエータ、12-0-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA)をプロモータとした二段階皮膚化学発癌実験を行なった。その結果、PLCεノックアウトマウスでは、野生型マウスに比べパピローマの発生時期が著明に遅延し、パピローマの発生個数が約4分の1に減少した。更に、扁平上皮癌へのプログレッションが全く起こらなかった。発生した腫瘍では全てH-ras遺伝子の61番目のコドンに活性型変異が見られた。この結果は、PLCεがras依存性の発癌に重要な役割を持つことを示し、PLCεが抗癌剤開発の新しい分子標的になりうることを示唆した。 2 PLCεノックアウトマウスは、半月弁形成異常による半月弁狭窄と逆流に起因する中等度の心室拡張を示した。この表現型は、上皮細胞増殖因子(EGF)受容体の活性低下変異マウスやヘパリン結合性EGFノックアウトマウスの表現型と酷似しており、PLCεがEGF受容体下流でRasのエフェクターとして半月弁形成に関わっていることが示唆された。 3 非常に構造が類似した低分子量G蛋白質RasとRap1が各々細胞膜とゴルジ装置という異なった細胞内局在を示す機構を一部解明した。両者のアミノ酸番号85-89の5残基の交換により細胞内局在が逆転する事を発見し、この小領域が局在特異性の決定に必要十分であることを示した。 4 X線結晶解析により、低分子量G蛋白質M-Ras (R-Ras3)のGDP, GTP結合型の高次構造を解明し、GTP結合認識機構とエフェクター結合認識機構がRas, Rap1とかなり異なることを示した。

Research Products

(4 results)

All Other

All Publications (4 results)

[Publications] Kazuhiro Nomura, et al.: "Identification of a novel domain of Ras and Rap1 that directs their differential subcellular localizations"The Journal of Biological Chemistry. 279・未定印刷中. (2004)
[Publications] Shuji Ueda, et al.: "Role of the Sec14-like domain of Dbl and Ost guanine nucleotide exchange factors in the regulation of Rho family GTP-binding proteins in different subcellular compartments"Cellular Signalling. 16・未定印刷中. (2004)
[Publications] Dongmei Wu, et al.: "Neuronal lineage-specific induction of phospholipase CE expression in the developing mouse brain"European Journal of Neuroscience. 17・8. 1571-1580 (2003)
[Publications] Kayo Hibino, et al.: "Single- and multiple-molecule dynamics of the signaling from H-Ras to c Raf-1 visualized on the plasma membrane of living cells"Chemphyschem. 4・7. 748-753 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

低分子量G蛋白質による細胞増殖の制御機構

Principal Investigator

片岡 徹 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40144472)

Research Products

[Publications] Kazuhiro Nomura, et al.: "Identification of a novel domain of Ras and Rap1 that directs their differential subcellular localizations"The Journal of Biological Chemistry. 279・未定 印刷中. (2004)

[Publications] Shuji Ueda, et al.: "Role of the Sec14-like domain of Dbl and Ost guanine nucleotide exchange factors in the regulation of Rho family GTP-binding proteins in different subcellular compartments"Cellular Signalling. 16・未定 印刷中. (2004)

[Publications] Dongmei Wu, et al.: "Neuronal lineage-specific induction of phospholipase CE expression in the developing mouse brain"European Journal of Neuroscience. 17・8. 1571-1580 (2003)

[Publications] Kayo Hibino, et al.: "Single- and multiple-molecule dynamics of the signaling from H-Ras to c Raf-1 visualized on the plasma membrane of living cells"Chemphyschem. 4・7. 748-753 (2003)

片岡徹神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40144472)

[Publications] Kazuhiro Nomura, et al.: "Identification of a novel domain of Ras and Rap1 that directs their differential subcellular localizations"The Journal of Biological Chemistry. 279・未定印刷中. (2004)

[Publications] Shuji Ueda, et al.: "Role of the Sec14-like domain of Dbl and Ost guanine nucleotide exchange factors in the regulation of Rho family GTP-binding proteins in different subcellular compartments"Cellular Signalling. 16・未定印刷中. (2004)