臨床用遺伝子導入ベクター開発を目的としたコモンマーモセット前臨床動物系の確立

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12217027
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 谷 憲三朗 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (00183864)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 浅野 茂隆 東京大学, 医科学研究所, 教授 (50134614)
• Keywords: SEREX / 腎癌腫瘍抗原 / SEREX抗原 / フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ性白血病 / マキシザイム / VSV-Gシュードタイプレンチウイルスベクター / CD19リポソーム / コモンマーモセット

Research Abstract

1)GM-CSF免疫遺伝子治療(GVAX)を受けた患者血清を用いたSEREX法による腎癌腫瘍抗原の同定:
GVAX接種後臨床経過が良好な患者培養腎癌細胞と腎癌細胞株よりcDNA発現λファージライブラリーを構築し、同症例の治療後血清でスクリーニング・陽性クローン挿入cDNA断片を解析し、計28クローンの腎癌SEREX抗原を得た。現在腎癌特異性を検討中である。
2)マキシザイム(Mz)法によるフィラデルフィア染色体陽性急性リンパ性白血病(PhALL)に対する治療法開発:
phALLの病因であるp190タイプ(ela2)bcr/abl融合遺伝子mRNAの切断活性を有する新規リボザイム・マキシザイムを構築し、VSV-Gシュードタイプレンチウイルス(HIV)ベクターを用いてMz遺伝子導入ベクターを作製した。本ベクターを用いてALL細胞5株に対して遺伝子導入を行い3株で細胞増殖の阻害とアポトーシスを認めた。全細胞でela2mRNAレベルの低下を認めたが、抵抗性2株では低下の程度が少なかった。患者初代ALL細胞に対しても同様の抗腫瘍効果を認めたが、ヒト臍帯血CD34細胞への影響はなかった。本法は難治性PhALLに対する新規治療法として有望であると考えられた。
3)CD19リポソームによるPhALL細胞標的化技術の開発:
PhALL細胞標的化技術開発を目的にCD19リポソームを作製しPhALL細胞への選択的取り込みを確認後、CD19リポソーム・イマチニブを作製しイマチニブ抵抗株を含むPhALL細胞への殺細胞効果を明らかにした。本法はヒト臍帯血CD34細胞に対する影響はなくPhALL標的化療法に有用であると考えられた。
4)PhALL疾患モデルコモンマーモセット(CM)の作出:
倫理委員会の承認を得た後phALLHIVベクターの作製とCM自家末梢血幹細胞の採集を終了しin vivo実験に着手している。

Research Products

• [Publications] Tomonari, A., Tani, K., et al.: "Second allogeneic hematopoietic stem cell transplantation for leukemia relapse after first allogeneic transplantation : outcome of 16 patients in a single institution."Int.Journal of Hematology. 75. 318-323 (2003)
• [Publications] Tomonari, A., Tani, K., et al.: "Acute myelogenous leukemia M5b developed during clinical remission of Castleman disease."Int.Journal of Hematology. 77. 274-276 (2003)
• [Publications] Kojima, T., Tani, K., et al.: "Tumor-derived Gp96 combined with GM-CSF gene-transduced tumor cells inhibit tumor growth in mice through migration and maturation of CD11c+ cells."Human Gene Therapy. 14. 715-728 (2003)
• [Publications] Tomonari, A., Tani, K., et al.: "Severe aplastic anemia with autoimmune thyroiditis showing no hematological response to intensive immunosuppressive therapy."Acta Hematology. 109. 90-94 (2003)
• [Publications] Yoshida, Y., Tani, K., et al.: "Mice lacking a transcriptional corepressor Tob are predisposed to cancer."Gene Dev. 17. 1201-1206 (2003)
• [Publications] Nagayama, H., Tani, K., et al.: "Results of phase I clinical study using autologous tumor-lysatepulsed monocyte-derived mature dendritic cell vaccinations for stage IV malignant melanoma patients combined with low dose interleukin-2"Melanoma Res. 13. 521-530 (2003)
• [Publications] Oshima, K., Tani, K., et al.: "Maxizymes and Small Hairpin-type RNAs that are driven by a tRNA promoter specifically cleave a chimeric gene associated with leukemia in vitro and in vivo."Cancer Res. 63. 6809-6814 (2003)
• [Publications] Nagamura, F., Tani, K., et al.: "Drug interactions : effect of cyclophosphamide on serum cyclosporine levels at the conditioning of hematopoietic stem cell transplantation."Bone Marrow Transplant. 32. 1051-1058 (2003)
• [Publications] Tomonari, A., Tani, K., et al.: "Varicella-zoster virus infection in adult patients after unrelated cord blood transplantation : a single institute experience in Japan."Brit J Haematology. 122. 802-805 (2003)
• [Publications] Tomonari, A., Tani, K., et al.: "Herpes simplex virus infection in adult patients after unrelated cord blood transplantation : a single institute experience in Japan."Bone Marrow Transplant. 33. 317-320 (2004)
• [Publications] Soda, Y., Tani, K., et al.: "A novel Maxizyme vector targeting a bcr-abl fusion gene induced specific cell death in Philadelphia chromosome-positive acute lymphoblastic leukemia."Blood. (in press). (2004)
• [Publications] Izawa, K., Tani, K., et al.: "Hematopoietic Activity of Common Marmoset CD34 Cells Isolated by a Novel Monoclonal Antibody MA24."Exp Hematology. (in press). (2004)
• [Publications] 谷 憲三朗 編: "遺伝子治療の方向性-新たな治療ベクターへの挑戦"先端医学社. 135 (2003)