2000 Fiscal Year Annual Research Report
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12217029
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
鈴木 紀夫 東京大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (10010050)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
細井 義夫 東京大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (50238747)
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| Keywords | 放射線感受性 / DNA-PK / XRCC4 / MOLT-4 / p41 / アポトーシス |
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| Research Abstract |
細胞固有の放射線感受性は腫瘍としての感受性の一部因子に過ぎず、組織としての生理的因子(p02、血流、増殖と分化、細胞死に関与する細胞外因子)、宿主との関係などを総合的に考慮する必要がある。本研究は、細胞固有の感受性を決定する因子を解明し、照射後のシグナル伝達とDNA二重鎖切断修復に重要と考えられるDNA-PKの機能メカニズムの解明と照射後のアポトーシスタイプの細胞死において発現する新規タンパク質p41の発現メカニズムの解明を行った。
1)DNA-PKによるリン酸化の真のSubstrate(標的タンパク)の探索
2)細胞死に先だって出現するタンパク質p41の発現メカニズムの解明
3)DNA-PK活性測定法と感受性指標としての問題点の解析
将来的に、放射線感受性を操作したり、新しい感受性指標の開発に発展させる基礎とすること、感受性予測に役立つ情報を集めることを目的とした。
1)XRCC4が照射後早期にDNA-PKによりリン酸化されることを見出した。
ヒト癌細胞HeLa、MOLT-4、M059K、M059J(DNA-PKcsを欠損する)、トランスフォームした健常人およびAT患者由来細胞やscid(DNA-PKcs欠損)、ATM-/-マウスから樹立したマウス胎児繊維芽細胞を用いて、DNA-PKcsの有無、ATMの有無、Western blottingと各種特異抗体の反応性、phosphatase処理効果などからXRCC4が照射後DNA-PKにより、リン酸化を受けることを確立した。
2)タンパク質p41は細胞死に先だって照射後早期にCaspase(主にCaspase7)依存性にp42N末端側18番目のアスパラギン酸残基のC末端で切断され生成することを解明した。
3)DNA-PK活性の特異的測定や組織細胞抗体染色による感受性予測の可能性を解析しているが、この有用性についての結論は時期早尚である。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Matsumoto,Y.: "Cleavage and phosphorylation of XRCC4 protein irrduced by X-irradiation."FEBS Lett.. 478. 67-71 (2000)
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[Publications] Tomita,M.: "Sensitization by wortmannin of heat- or X-ray induced cell death in cultured chinese hamster V79 cells."J.Radiat.Res.. 41. 93-102 (2000)
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[Publications] Enomoto,A.: "Involvement of SAPK/JNK pathway in X-ray-induced rapid cell death of human T-cell leukemia cell line MOLT-4."Cancer Lett.. 155. 137-144 (2000)
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[Publications] Morita,A.: "p41as a possible marker for cell death is generated by caspase cleavage of p42/SET β in irradiated MOLT-4 cells."Biochemical and Biophysical Research Communications. 278. 627-632 (2000)
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[Publications] Kang,Y.: "Increased expression after X-irradiation of MUC1 in cultured human colon carcinoma HT-29 cells."Jpn.J.Cancer Res.. 91. 324-330 (2000)
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[Publications] H.-J.Zhao,: "DNA-dependent protein kinase activity correlates with Ku70 expression and radiation sensitivity in esophageal cancer cell lines."Clin.Cancer Res.. 6. 1073-1078 (2000)
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[Publications] Sakata,K.: "Expression of Genes involved in Repair of DNA Double-strand Breaks in Normal and Tumor Tissues."Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.. 49. 161-167 (2001)
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[Publications] Enomoto,A.: "Involvement of c-Jun NH_2-terminal kinase-1 in heat-induced apoptotic cell death of human monoblastic leukemia U937 cells."Int.J.Radiat.Biology. (in press). (2001)
