2002 Fiscal Year Annual Research Report
ヘルペスウイルスをベクターとした小型ピロプラズマ症に対する組換えワクチンの開発
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12306016
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| Research Institution | Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine |
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Principal Investigator |
藤崎 幸蔵 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (00292095)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大塚 治城 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (80261957)
玄 学南 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 助教授 (10292096)
五十嵐 郁男 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (80159582)
神尾 次彦 帯広畜産大学, 原虫病研究センター(独)農業研究機構・動物衛生研究所, 客員教授・研究室長
井上 昇 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 講師 (10271751)
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| Keywords | 小型ピロプラズマ症 / Theileria orientalis / ヘルペスウイルス / 組換えワクチン / Babesia原虫 / 遺伝子クローニング / 媒介マダニ / フタトゲチマダニ |
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| Research Abstract |
ウシ小型ピロプラズマ症は、Theileria orientalis orientalisならびにT.o.sergenti原虫によって惹起されるマダニ媒介性の住血原虫病である。とくに日本を含む東アジア諸国において被害が甚大であり、放牧経営における最大の障害として長年問題視されてきた。本病の対策は、これまで牛体への殺原虫剤の投与と媒介マダニの撲滅を目的とする殺ダニ剤の適用に頼ってきたが、これらの薬剤の使用は、環境保全や食品安全の面から問題のあることが懸念され、新たな対応策、とりわけワクチンの開発が急務となっている。このような社会的・学術的背景に鑑み、本研究は、新しいタイプのヘルペスウイルスをベクターとした組換えワクチンの開発を行うことを目的とする。
平成14年度においては、(1)抗マダニワクチン開発の一環として、マダニ吸血に対する宿主の免疫獲得機序におけるスカベンジャーレセプターやインターフェロンγの役割を検討した、(2)本研究を開始直後にTakahimaら(Vet Parasitol 84,65-73,1999)がp32/33遺伝子の組換え体ウシヘルペスウイルスの作成に成功し、感染防御効果が極めて優れていることを報告した。(3)そこで、p32/33を凌ぐ優れた新規導入用遺伝子を探索するため、当初の研究計画を一部変更し赤内型ピロプラズムのEST解析を開始した。(4)得られたCysteine proteaseおよびGTP binding Protein遺伝子の情報から、この遺伝子を含むゲノム断片をクローニングして塩基配列を決定した。(5)この領域には他のタイレリア属原虫のスポロゾイト表面蛋白質に相同な遺伝子は検出されなかったが、マラリア原虫表面蛋白質と一部相同性の認められるコード領域の存在を確認した。(6)このうち2つを大腸菌/昆虫細胞系で発現させ、抗体を作製し、赤内型原虫での発現を免疫学的に確認した。(7)これらは新規蛋白質であり、現在、遺伝子を導入した組み換え体ヘルペスウイルスを作成中である。
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[Publications] Inokuma, H.: "Tick infestation of sika deer (Cervus nippon) in the western part of Yamaguti prefecture, Japan"J.Vet.Med.Sci.. 64・7. 615-617 (2002)
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[Publications] Makala, L.H.: "Phenotype and function of murine peritoneal cavity macrophage derived-dendritic cells"J.Vet.Med.Sci.. 64・9. 813-820 (2002)
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[Publications] Makala, L.H.: "The current status of major tick borne diseases in Zambia"Vet.Res.. 34・1. 27-45 (2003)
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[Publications] Nagai, A.: "Growth-inhibitory effects of artesunate, pyrimethamine, and pamaquine against Babesia equi and Babesia caballi in in vitro cultures"Antimicrob.Agents Chemotherap.. 47・2. 800-803 (2003)
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[Publications] You, M.: "Molecular characterization of a chitinase protein from the hard tick Haemaphysalis longicornis"J.Biol.Chem.. 278・10. 8556-8563 (2003)
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[Publications] Bork, S.: "Growth-inhibitory effects of tricosan on equine and bovine Babesia parasites"Amer.J.Trop.Med.Hyg.. (印刷中). (2003)
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[Publications] Sugimoto, C.: "Non-transforming Theileria parasites. World Class Parasites, Vol.3, Theileria."Kluwer Academic Publishers. 93-105 (2002)
