2001 Fiscal Year Annual Research Report

動物細胞オートファジーの栄養生理的・分子的調節機構の解析

Research Project

Project/Area Number	12460056
Research Institution	NIIGATA UNIVERSITY
Principal Investigator	門脇基二新潟大学, 農学部, 教授 (90126029)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	吉澤史昭宇都宮大学, 農学部, 助教授 (10269243) 藤村忍新潟大学, 農学部, 助教授 (20282999)
Keywords	オートファジー / 肝臓 / タンパク質分解 / アミノ酸 / インスリン / 米タンパク質 / シグナリング / 膜融合
Research Abstract	本年度得られた成果は以下の通りである。 A.オートファジーの栄養生理的役割:肝臓のin vivoタンパク質分解速度に対する米タンパク質と小麦タンパク質(グルテン)の効果を大豆タンパク質と比較したところ、米タンパク質は大豆の約2倍となりグルテンは米タンパク質とほぼ同等であった。従って昨年に引き続き、食品タンパク質の質の違いによる肝臓代謝回転の調節が認められた。 B.アミノ酸によるオートファジー形成段階の調節機構の解析 a)肝細胞膜上のアミノ酸'受容体'の検索:予想される'受容体'に対するリガンドとして、ロイシンの誘導体であるLeu-MAPに対してASA化とビオチン化を行い、ASA基と膜タンパク質とをPhotoaffinity labelingにより結合させ、ビオチン基をアビジン処理樹脂と結合させて標的タンパク質を濃縮している。 b)α-トキシン細胞を用いたアミノ酸作用の細胞内伝達因子の検索:昨年作成のrecombinant α-トキシンの活性は、予想より若干小さなポアサイズ(ATP不透過)であったが、安定した成績を示し、また肝臓抽出物の効果を確認出来た。また、抽出物作成ステップのいくつかを改良した。肝臓抽出物は調節アミノ酸(8種)と非調節アミノ酸(12種)、また単独のアミノ酸としてはロイシンで刺激したものを作成し、比較した。調節アミノ酸群はタンパク質分解抑制作用を示し、その活性は抽出物を酢酸エチルで抽出した画分に認められた。 c)アミノ酸の作用機構としてのリン酸化カスケードの可能性:昨年mTOR系の関与は否定されたが、最も下流に位置する候補として、オートファジー膜タンパク質LC3のアミノ酸に対する応答性を調べたところ、LC3のI型からII型への変換がアミノ酸により抑制された。 C.オートファジー成熟段階測定法の開発と調節機構の解析:ML画分を用いて、サイトゾル酵素BHMTのフラグメントp32をプローブとして、オートファゴソームとリソソームの膜融合反応の検出とサイトゾルタンパク質の効果を調べている。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Fujimura, S., et al.: "Effect of Restricted Feeding before Marketing on Taste Active Components of Broiler Chickens"Animal Science Journal. 72(3). 223-229 (2001)
[Publications] Tanimonto, H. et al.: "Natto Mucilage Containing Poly-γ-glutamic Acid Increase Soluble Calcium in the Rat Small Intestine"Bioscience, Biotechnology and Biochemistry. 65(3). 516-521 (2001)
[Publications] 門脇基二他: "オートファジー調節に関わるアミノ酸とインスリンのシグナリング機構"必須アミノ酸研究. No.161. 31-35 (2001)
[Publications] 林裕造他: "健康増進へのアミノ酸の生理的役割-適正摂取評価への取り組み-"ILSI(イルシー). No.68. 87-92 (2001)
[Publications] Mortimore, G.E. et al.: ""The Endocrine Pancreas and Regulation of Metabolism", Handbook of Physiology, Section 7, Volume II"American Physiological Society, Oxford University Press. 1254 (2001)
[Publications] 石橋晃監修: "新編動物栄養試験法"養賢堂. 642 (2001)

2001 Fiscal Year Annual Research Report

動物細胞オートファジーの栄養生理的・分子的調節機構の解析

Principal Investigator

門脇 基二 新潟大学, 農学部, 教授 (90126029)

Research Products

[Publications] Fujimura, S., et al.: "Effect of Restricted Feeding before Marketing on Taste Active Components of Broiler Chickens"Animal Science Journal. 72(3). 223-229 (2001)

[Publications] Tanimonto, H. et al.: "Natto Mucilage Containing Poly-γ-glutamic Acid Increase Soluble Calcium in the Rat Small Intestine"Bioscience, Biotechnology and Biochemistry. 65(3). 516-521 (2001)

[Publications] 門脇基二他: "オートファジー調節に関わるアミノ酸とインスリンのシグナリング機構"必須アミノ酸研究. No.161. 31-35 (2001)

[Publications] 林 裕造 他: "健康増進へのアミノ酸の生理的役割-適正摂取評価への取り組み-"ILSI(イルシー). No.68. 87-92 (2001)

[Publications] Mortimore, G.E. et al.: ""The Endocrine Pancreas and Regulation of Metabolism", Handbook of Physiology, Section 7, Volume II"American Physiological Society, Oxford University Press. 1254 (2001)

[Publications] 石橋 晃監修: "新編動物栄養試験法"養賢堂. 642 (2001)

門脇基二新潟大学, 農学部, 教授 (90126029)

[Publications] 林裕造他: "健康増進へのアミノ酸の生理的役割-適正摂取評価への取り組み-"ILSI(イルシー). No.68. 87-92 (2001)

[Publications] 石橋晃監修: "新編動物栄養試験法"養賢堂. 642 (2001)