2001 Fiscal Year Annual Research Report
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12460089
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
大島 泰克 東北大学, 大学院・生命科学研究科, 教授 (60111267)
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| Keywords | 麻痺性貝毒 / サキシトキシン / アフィニティークロマトグラフィー / サキシトキシン結合タンパク |
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| Research Abstract |
(1)麻痺性貝毒生産ラン藻Anabaena circinalisの大量培養法を開発し、合計100Lの培養し、培養濾液から活性炭カラムクロマトグラフィーによって毒を効率的に吸着、濃縮し、2段階のクロマトグラフィーにより高収率で化学反応の出発物質となる基質毒C1,C2およびゴニオトキシン2,3を精製した。
(2)ゴニオトキシン2,3の11位へ3メルカプトプロピオン酸を導入し、次いでカルボジイミドを使って合成ポリマーSephalose4Bに結合させた。更に、ゲル上の余剰のアミノ基を酢酸エステル化で遮蔽して、麻痺性貝毒結合高分子用のアフィニティークロマト資材を調整した。
(3)C1,C2から2段階でデカルバモイルサキシトキシンを調整し、13位ヘコハク酸を導入し、同様にSephalose4Bに結合させ、アミノ基を遮蔽して第2のアフィニティークロマト資材を調製した。
(4)調整した11位アフィニティークロマト資材について、STX結合能タンパクの存在が知られているヒガンフグ及びウシガエル血漿からの精製に適用し、前者の濃度効果が高いことを明らかにした。また、長期保存に耐えうることを明らかにして、実用性を証明した。
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