2001 Fiscal Year Annual Research Report
カゼインmRNAポリAの調節機構と乳腺の老化に関する研究
Project/Area Number |
12460122
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Research Institution | THE UNIVERSITY OF TOKYO |
Principal Investigator |
酒井 仙吉 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (80114487)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
青木 不学 東京大学, 大学院・新領域創成科学研究科, 助教授 (20175160)
今川 和彦 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (00291956)
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Keywords | 老化と乳腺 / 老化とポリA / 老化と乳腺機能 / mRNAと半減期 / カゼインmRNA / mRNAの半減期 / 泌乳曲線 |
Research Abstract |
マウスの乳腺では、分娩の直前からミルクの合成が如まり、合成量は徐々に増加し12〜13日に最大になる。以後急速に減少し18日頃に停止する。この間で細胞分裂は起こらないため、泌乳量は乳腺細胞の機能の活性を反映する。この実験系を用いてカゼインmRNAの安定性と老化に関する研究を行った。 実験には妊娠13日(妊娠中期)から泌乳17日(泌乳末期)までの様々な時期のマウスを用いた。RNAを抽出し、ノーザンブロットによりカゼインmRNAを可視化した。RNAはオリゴdTの存在・非存在下で反応させ、RNase HでポリAを消化し、その差からポリAの長さを決定した。また、6時間乳腺をmRNA合成阻害剤を加えて培養し、mRNAの消失速度から半減期を測定した。βとγカゼインmRNAについて調べた。 妊娠中ではポリAの長さは約50塩基であったが、カゼインの合成が始まると約100塩基となり、泌乳中期までほぽこの長さが保たれていたが、泌乳15日あるいは18日では約60塩基と短くなった。ポリAの長さは転写の段階で決まり、ポリAポリメラーゼ活性と平行して変化した。一方、カゼインmRNAの半減期においても同様な変化が見られた。βカゼインmRNAの半減期は、妊娠中約10時間であったが、妊娠18日では17時間、泌乳1日では19時間と安定となった。しかし泌乳18日では約5時間と不安定になった。 mRNAの安定性はポリAの長さと関係することを明らかにした。ポリAの長さは核の中で起こる転写の段階で決まり、乳腺の活性化と老化との関係を明らかにした。
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[Publications] Kuraishi, T., Mizoguchi, Y., Sun, Y. Sakai, S, 他: "The casein mRNA decay changes in parallel with the polly(A) tail length in the mouse mammary gland"Molecular and Cellular Endocrinology. (印刷中). (2002)
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[Publications] Sun, Y., Nonobe, E., Aoki, F., Sakai, S, 他: "Characterization and expression of L-amino acid oxidase of mouse milk"Journal of Biological Chemistry. (印刷中). (2002)
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[Publications] Sun, Y., Kuraishi, T., Aoki, F., Sakai, S: "Hormonal regulation of mitochondrial Tim23 gene expression in the mouse mammary gland"Molecular and Cellular Endocrinology. 172. 177-184 (2001)
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[Publications] Yoneda, M., Shiraishi, J., Kuraishi, T., Sakai, S. 他: "Gastric proteinase digestion of caseins in new born pups of the mouse"Journal of Dairy Science. 84. 1851-1855 (2001)
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[Publications] Fuchimoto D, Mizukoshi A, Sakai S, Aoki, F.: "Posttranscriptional regulation of cyclin A1 and cyclin A2 during mouse oocyte meiotic maturation and preimplantation"Developmental Biol.ogy and Reproduction. 65. 986-993 (2001)
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[Publications] Hara, K., Sakai S., Nagata M., Aoki F: "Expression of protein tyrosine phosphatases in the preimplantation mouse embryos"Animal Science Journal. 72. 404-409 (2001)
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[Publications] 森田琢磨, 酒井仙吉, 唐澤 豊, 近藤誠司: ""家畜"のサイエンス"文永堂出版. 189 (2002)