2000 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
12470026
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
仲野 徹 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (00172370)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
木村 透 大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (50280962)
鈴木 聡 大阪大学, 微生物病研究所, 講師 (10311565)
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Keywords | 幹細胞 / 始原生殖細胞 / 遺伝子破壊 / 細胞分化 / PTEN |
Research Abstract |
幹細胞システムの成立を明らかにするために、始原生殖細胞・生殖幹細胞研究の実験システムを構築すると同時に、いくつかの機能分子の解析をおこなっている。以下にその概略を示す。 (1)TNAP-GFPマウスの作成 始原生殖細胞をマーキングするために、始原生殖細胞において特異的に発現するTNAP(tissue non-specific alkaline phosphatase)遺伝子座に、蛍光タンパクであるEGFPをノックインしたマウスを作成した。このマウスは、予想通り始原生殖細胞においてEGFPを発現し、始原生殖細胞研究に有用である。 (2)Cre-loxPシステムを用いた始原生殖細胞におけるシグナルの解析 TNAP-Creノックインマウスを用いて、いくつかのfloxedマウスとの交配を行い、始原生殖細胞特異的な遺伝子破壊による、遺伝子機能解析を行なっている。転写因子の一つであるSTAT3、SrcファミリーのキナーゼであるCSKでは始原生殖細胞の動態に変異は認められなかったが、がん抑制遺伝子PTENを始原生殖細胞で特異的に破壊したマウスでは、その移動や成熟に顕著な障害が認められた。 (3)gcl遺伝子の機能解析 ショウジョウバエの始原生殖細胞の成立に重要な機能を持つgcl遺伝子のマウスホモログの機能を解析するために、遺伝子ターゲティングマウスの作成を行い、現在、その解析を行なっている。また、two hybrid法による結合タンパクの単離を行なっている。 (3)mili、mili遺伝子の機能解析 ショウジョウバエの生殖幹細胞の成立に重要な機能を持つpiwi遺伝子のマウスホモログmiwi、mili遺伝子を単離し、その発現パターンを解析した。また、これらのタンパクがRNA結合能を有することを明らかにした。
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[Publications] T.Era,Y.Takagi,T.Takahashi,J.C.Bories,T.Nakano: "Characterization of hematopoietic lineage specific gene expression by ES cell in vitro differentiation induction system"Blood. 95. 880-878 (2000)
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[Publications] T.Takahashi,N.Suwabe,P.Dai,M.Yamamoto,S.Ishii,T.Nakano: "Inhibitory interaction of c-Myb and GATA-1 via transcriptional co-activator CBP"Oncogene. 19. 134-140 (2000)
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[Publications] Kato,A.M.Morrison,T.Nakano,K.Tashiro,T.Honjo: "ESOP-1, a secreted protein expressed in the hematopoietic, nervous and reproductive systems of embryonic and adult mouse"Blood. 96. 362-364 (2000)
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[Publications] T.Kimura,Y.Sonoda,N.T.Izui,M.Suda,K.Sasaki,T.Nakano: "Proliferation and cell death of embryonic primitive erythrocytes"Exp Hematol. 28. 635-641 (2000)
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[Publications] K.Matsumoto,K.Yasui,Y.Tani,H.Shibata,T.Nakano: "In Vitro proliferation potential of AC133 positive cells in peripheral blood"Stem Cells. 18. 196-203 (2000)
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[Publications] Embryonic stem cell: Internal Medicine. (in press). (2001)