2000 Fiscal Year Annual Research Report

生体防御を担う食細胞NADPHオキシダーゼ活性化制御の分子機構

Research Project

Project/Area Number	12470028
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	住本英樹九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (30179303)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	栗林太九州大学, 大学院・医学研院, 助手 (60251443)
Keywords	生体防御 / NADPHオキシダーゼ / シトクロムb_<558> / 蛋白質間相互作用 / p47^<phox> / p67^<phox> / p40^<phox> / NOX4
Research Abstract	食細胞NADPHオキシダーゼの酵素本体は、細胞膜のシトクロムb_<558>(b_<558>)である。本酵素の活性化には、特異的アダプター蛋白質(p47^<phox>,p67^<phox>とp40^<phox>:各々SH3ドメインをもつ)が刺激依存性に細胞質から細胞膜に移行してb_<558>(gp91^<phox>とp22^<phox>の両サブユニットから成る)と相互作用する必要がある。平成12年度は以下のような成果を得た。 (1)b_<558>と細胞質因子の相互作用は、p47^<phox>SH3ドメインとp22^<phox>の細胞質領域との結合に依存するが、p47^<phox>C末領域の3つのセリン残基(Ser-303,304,328)のリン酸化が、SH3ドメインのunmasking、p22^<phox>との結合、及びオキシダーゼ活性化能誘導に必要であることを示し、更にアラキドン酸がリン酸化と協同的に働いてp47^<phox>の構造変化を引起こしオキシダーゼを活性化することを明らかにした。 (2)p40^<phox>は休止時細胞でp67^<phox>と会合しているが、これは新規なドメイン間(それぞれPCモチーフとPB1ドメイン)の新しいタイプの蛋白質間相互作用によるものであること、この結合がオキシダーゼ活性化を正に制御していること等を示した。PB1ドメインは酵母のシグナル伝達蛋白質Bem1pにも存在し、その役割を明らかにすると共に、その3次構造決定に成功した。 (3)p47^<phox>のN末領域に新規ドメイン(PB2ドメイン)を見い出し、その3次構造決定すると共に、PB2ドメインがPIP結合ドメインであり、p47^<phox>の膜移行に必須であることを明らかにした。 (4)腎臓尿細管上皮細胞に高発現している新規gp91^<phox>ホモログ(NOX4と命名)を見い出し、そのcDNAクローニングに成功した。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Takeya,R., et al.: "Interaction of the PDZ domain of Human PICK1 with Class I ADP-Ribosylation Factors."Biochemical and Biophysical Research Commucations. 267. 149-155 (2000)
[Publications] Shiose,A.& Sumimoto,H.: "Arachidonic acid and phosphorylation synergistically induce a con formational change of p47^<phox> to activate the phagocyte NADPH Oxidase."The Journal of Biological Chemistry. 275. 13793-13801 (2000)
[Publications] Tanaka,H., et al.: "A Novel Intracelluar Membrane-Bound Calcium-Independent Phospholipase A_2"Biochemical and Biophysical Research Commucations. 272. 320-326 (2000)
[Publications] Shiose,A., et al.: "A Novel Superoxide-producingNAD(P)H Oxidase in Kidney"The Journal of Biological Chemistry. 276. 1417-1423 (2001)
[Publications] Noda,Y., et al.: "Human hpmplogues of Caenorhabditis elegans cell polarity protein PRA6 as an adaptor that links the samll GTPases Rac and Cdc42 to atypical protein kinase C"Genes to Cells. 6. 107-119 (2001)
[Publications] 住本英樹,伊藤隆司: "ドメイン構造からみた活性酸素生成のシグナリング"実験医学. 18. 2505-2511 (2000)
[Publications] 栗林太,住本英樹: "基礎生化学実験法"東京化学同人. 245 (2000)
[Publications] 住本英樹: "バイオサイエンスの新世紀・第5巻"共立出版. 196 (2000)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

生体防御を担う食細胞NADPHオキシダーゼ活性化制御の分子機構

Principal Investigator

住本 英樹 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (30179303)

Research Products

[Publications] Takeya,R., et al.: "Interaction of the PDZ domain of Human PICK1 with Class I ADP-Ribosylation Factors."Biochemical and Biophysical Research Commucations. 267. 149-155 (2000)

[Publications] Shiose,A.& Sumimoto,H.: "Arachidonic acid and phosphorylation synergistically induce a con formational change of p47^<phox> to activate the phagocyte NADPH Oxidase."The Journal of Biological Chemistry. 275. 13793-13801 (2000)

[Publications] Tanaka,H., et al.: "A Novel Intracelluar Membrane-Bound Calcium-Independent Phospholipase A_2"Biochemical and Biophysical Research Commucations. 272. 320-326 (2000)

[Publications] Shiose,A., et al.: "A Novel Superoxide-producingNAD(P)H Oxidase in Kidney"The Journal of Biological Chemistry. 276. 1417-1423 (2001)

[Publications] Noda,Y., et al.: "Human hpmplogues of Caenorhabditis elegans cell polarity protein PRA6 as an adaptor that links the samll GTPases Rac and Cdc42 to atypical protein kinase C"Genes to Cells. 6. 107-119 (2001)

[Publications] 住本英樹,伊藤隆司: "ドメイン構造からみた活性酸素生成のシグナリング"実験医学. 18. 2505-2511 (2000)

[Publications] 栗林太,住本英樹: "基礎生化学実験法"東京化学同人. 245 (2000)

[Publications] 住本英樹: "バイオサイエンスの新世紀・第5巻"共立出版. 196 (2000)

住本英樹九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (30179303)