2002 Fiscal Year Annual Research Report
コンディショナルジーンターゲティング法による生体内糖脂質の機能解析
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12470055
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| Research Institution | OSAKA UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
竹田 潤二 大阪大学, 先端科学技術共同研究センター, 教授 (50163407)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
近藤 玄 大阪大学, 医学研究科, 助教授 (40243258)
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| Keywords | LCB2遺伝子 / Cre / loxP / Tリンパ球 / コンディショナルジーンターゲティング / スフィンゴ脂質 / キメラマウス / トランスジェニックマウス |
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| Research Abstract |
1.表皮特異的スフィンゴ脂質欠損マウス作製
表皮は他の臓器と異なり、セラミドを中心としたスフィンゴ脂質に富んでいる。そのスフィンゴ脂質は、表皮バリヤーとして重要であることが示唆されているが、直接的な証拠は存在しない。そこで、スフィンゴ脂質生合成の最初のステップであるserineとpalmitoilCoAの縮合反応を触媒するSerine-palmitoil transferaseをコードとする遺伝子LCB2のエクソンにloxP配列が挿入されたマウスを作製した。そのマウスは離乳時に死亡し、電顕で顆粒層でみられるlamellar granuleの中の層構造が完璧に消失していることが判明した。さらに質量分析を施行したところ、スフィンゴ脂質のプロファイルが劇的に変化していることも判明した。
2.スフィンゴ脂質欠損Tリンパ球を解析するためLCBfloxマウスとLck-Creマウスの交配
Tリンパ球特異的にLCB2遺伝子を破壊し、スフィンゴ脂質が欠損したTリンパ球を有するマウスを交配により樹立した。胸腺を解析すると、CD4^+、CD8^+シングルポジティブ細胞が極端に減少していたので、スフィンゴ脂質が胸腺内の選択に重要な役割をはたしていることが判明した。一方、マイクロドメインの消滅は認められず、マイクロドメインに集積する膜タンパク質の直進が観察された。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Kira, M., et al.: "STAT3 deficiency in keratinocytes leads to compromised cell migration through hyperphosphorylation of p130cas"J Biol Chem. 277. 12931-12936 (2002)
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[Publications] Koike, H., et al.: "Efficient biallelic mutagenesis with Cre/loxP-mediated inter-chromosomal recombination"EMBO Rep. 3. 433-437 (2002)
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[Publications] Gao, X., et al.: "Rapid compensation for glycosylphosphatidylinositol(GPI)-anchor deficient keratinocytes after birth : Visualization of GPI-anchored proteins in situ"J.Invest.Dermatol.. 118. 998-1002 (2002)
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[Publications] Yokoyama C, et al.: "Prostacyclin-deficient mice develop ischemic renal disorders, including nephrosclerosis and renal infarction"Circulation. 06. 2397-2403 (2002)
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[Publications] Murakami Y et al.: "Inefficient response of T lymphocytes to glycosylphosphatidylinositol anchor-negative cells : implications for paroxysmal nocturnal hemoglobinuria"Blood. 100. 4116-4122 (2002)
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[Publications] Suzuki A, et al.: "Keratinocyte-specific Pten Deficiency Results In Epidermal Hyperplasia, Accelerated Hair Follicle Morphogenesis and Tumor Formation"Cancer Res. 63. 674-681 (2003)
