2000 Fiscal Year Annual Research Report
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12470072
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
松浦 善治 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (50157252)
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| Keywords | HCV / 感染機構 / リセプター / 細胞融合 |
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| Research Abstract |
C型肝炎ウイルスC(HCV)の肝細胞における感染機構の知見は極めて乏しく、本研究はHCVの肝細胞への吸着に関与する細胞膜受容体を解明し、感染過程を明らかにすることを目的とする。
HCVのエンベロープ蛋白(E1及びE2)は感受性細胞のリセプターとの結合し細胞内への侵入に重要な役割を果たしているものと考えられている。HCVエンベロープ蛋白の細胞内腔での存在様式を解析し、エンベロープ蛋白の小胞体残留シグナルならびに細胞膜貫通領域を同定した。さらに、HCVのエンベロープ蛋白を細胞表面に発現させるために、これら細胞膜貫通領域を他の蛋白と交換したキメラ遺伝子を作成した。このキメラエンベロープ蛋白とT7RNAポリメラーゼを細胞に発現させ、予めT7プロモーターの下流にリポーター遺伝子を組み込んだプラスミドを導入したターゲット細胞と混合培養して、リポーター遺伝子活性化を指標に細胞融合活性を評価した。その結果、HCVの細胞融合にはE1とE2の両者が必須であり、その認識分子としては、ヒトCD81だけでなく、他の細胞表面の蛋白分子や硫酸多糖が重要な候補であることが示唆された。また、低pH処理が融合活性に必要なことから、HCVはエンドサイトーシスによって細胞に取り込まれ、エンドゾーム内の低pH環境下でエンベロープ蛋白が構造変換を来たし、細胞融合能を獲得して細胞内へ侵入するものと考えられた。
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[Publications] Tanaka Y.: "Selective binding of hepatitis C virus core protein to synthetic oligonucleotides corresponding to the 5'untranslated region of the viral genome."Virology. 270. 229-236 (2000)
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[Publications] Takikawa S.: "Cell fusion activity of hepatitis C virus envelope proteins."J.Virol.. 74. 5066-5074 (2000)
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[Publications] Tatsuo H.: "Virus entry is a major determinant of cell tropism of Edmonston and wild-type strains of measles virus as revealed by vesicular stomatitis virus pseudotypes bearing their envelope proteins."J.Virol.. 74. 4139-4145 (2000)
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[Publications] Kamei A.: "Induction of hepatitis C virus-specific cytotoxic T lymphocytes in mice by an intrahepatic inoculation with an expression plasmid."Virology. 273. 120-126 (2000)
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[Publications] Utama A.: "Role of the DExH motif of the Japanese encephalitis virus and hepatitis C virus NS3 proteins in the ATPase and RNA helicase activities."Virology. 273. 316-324 (2000)
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[Publications] Aizaki H.: "Suppression of interferon-induced antiviral activity in cells expressing hepatitis C virus proteins."Interferon Cytokine Res.. 20. 1111-1120 (2000)
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[Publications] Tani H.: "Characterization of cell surface determinants important for baculovirus infection."Virology. 279. 343-353 (2001)
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[Publications] Suzuki R.: "Ubiquitin-mediated degradation of hepatitis C virus core protein is regulated by processing at its carboxyl terminus."Virology. 280. 301-309 (2001)
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[Publications] 谷英樹: "バキュロウイルスを用いた哺乳動物細胞への遺伝子導入"細胞. 33. 30-34 (2001)
