2002 Fiscal Year Annual Research Report
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12470072
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
松浦 善治 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (50157252)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
宮沢 孝幸 大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (80282705)
森石 恆司 大阪大学, 微生物病研究所, 助教授 (90260273)
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| Keywords | HCV / 感染機構 / リセプター / シュードタイプウイルス |
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| Research Abstract |
C型肝炎ウイルス(HCV)の肝細胞における感染機構の知見は極めて乏しい。本研究はHCVの肝細胞への吸着に関与する細胞膜受容体を解明し、感染過程を明らかにすることを目的とする。
HCVの感染の初期過程を解析するため、HCVのエンベロープ蛋白質を粒子表面に被ったシュードタイプウイルス及び細胞融合検出系を構築した。これまでの成績から、ヒト肝癌由来のHepG2細胞にHCVの細胞融合ならびに感染を許容するヒトCD81以外の蛋白因子が存在することが推測される。そこで、HepG2細胞からHCVのレセプター分子の同定を進め以下の成績を得た。
1)HepG2細胞からmRNAを分離し、そのcDNA発現ライブラリーを作製した。これをシュードタイプウイルスに全く感受性を示さなかったCHO細胞に導入した。
2)この細胞にシュードタイプウイルスが感染するとGFPを発現する。そこでGFP発現細胞をセルソーターで回収し、そこから発現プラスミドを回収して再度、細胞に導入する操作を繰り返すことによってリセプター遺伝子の同定を進めている。
3)HepG2細胞の細胞膜画分を抗原としてマウスを免疫して、細胞融合やシュードタイプウイルスの感染を中和できるモノクローナル抗体を作製した。上記の中和抗体が認識する分子を精製した結果、いくつかの候補分子がクローニングされた。
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[Publications] Burioni R.: "Diverging effects of human recombinant anti-hepatitis C virus (HCV) antibody fragments derived from a single patient on the infectivity of a vesicular stomatitis virus/HCV pseudotype"Journal of Virology. 76. 11775-11779 (2002)
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[Publications] Aizaki H.: "Expression profiling of liver cell lines expressing entire-or parts of hepatitis C virus open reading frame"Hepatology. 36. 1431-1438 (2002)
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[Publications] Dubourdeau M.: "Infection of HepG2 cells with recombinant adenovirus encoding the HCV core protein induces p21^<wafl> down-regulation ; effect of transforming growth factor β"Journal of Hepatology. 37. 486-492 (2002)
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[Publications] Fukuta M: "Racl and Cdc42 capture microtubules through IQGAP1 and CLIP-170"Cell. 109. 837-885 (2002)
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[Publications] Matsui M.: "Induction of hepatitis C virus-specific cytotoxic T lymphocytes in mice by immunization with dendritic cells transduced with replication-defective recombinant adenovirus"Vaccine. 21. 211-220 (2002)
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[Publications] Tsutsumi T.: "Interaction of hepatitis C virus core protein with retinoid X receptor a modulates its transcriptional activity"Hepatology. 35. 937-946 (2002)
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[Publications] Tsutsumi T.: "Alteration of intrahepatic cytokine expression and AP-1 activation in transgenic mice expressing hepatitis C core protein"Virology. 304. 415-424 (2002)
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[Publications] Ishii K.: "Structural analysis of vaccinia virus DIs strain : Application as a new replication-deficient viral vector"Virology. 302. 433-444 (2002)
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[Publications] Moriishi K.: "Structural analysis of vaccinia virus DIs strain : Application as a new replication deficient viral vector"Virology. 292. 258-271 (2002)
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[Publications] 松浦善治: "C型肝炎ウイルスの感染機構"ウイルス. 52. 185-190 (2002)
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[Publications] 松浦善治: "C型肝炎ワクチンの開発"総合臨床. 51. 1919-1923 (2002)
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[Publications] Miyamura T., Matsuura Y: "Viral Hepatitis and Liver Disease"Virus-cell interaction during initial stage of hepatitis C virus infection. 4 (2002)
