2000 Fiscal Year Annual Research Report

フィコリンによる補体レクチン経路の活性化機構

Research Project

Project/Area Number	12470079
Research Institution	Fukushima Medical University
Principal Investigator	藤田禎三福島県立医科大学, 医学部, 教授 (20134223)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	高橋実福島県立医科大学, 医学部, 助手 (00285024) 松下操福島県立医科大学, 医学部, 講師 (00165812)
Keywords	自然免疫 / 補体 / レクチン経路 / フィコリン / MASP / 遺伝子改変マウス
Research Abstract	本研究は、フィコリンの生体内での役割を明らかにするものであり、平成12年度には以下の成果が得られた。 A.フィコリンによるレクチン経路活性化:ヒト血清からN-アセチルグルコサミン結合カラムと抗MBLカラムを用いてMBLフリーのFicolin/P35を精製し、このFicolin/P35にMASP-1/MASP-2/sMAPが結合していることをウエスタンブロッティングで明らかにした。血清中においてもFicolin/P35がMASP-1/MASP-2/sMAPと結合しており、補体系を活性化することを溶血活性で明らかにした。これらの結果は、MBLに加えてフィコリンがレクチン経路を活性化することを明らかにし、J.ImmunolのCutting Edgeに掲載された。 B.フィコリン欠損マウスの作製:マウスフィコリンのフィブリノーゲン様構造をコードする遺伝子のエクソンを含むゲノムを標的部位としてネオマイシン遺伝子による置換型の相同組み換えをするためのベクターを構築した。これをES細胞に形質導入し、相同組み換えを起こしたES細胞をすでに得ている。現在、このES細胞をマウス胚盤胞へ入れ込み、仮親からキメラマウスを産ませているところで、今後、キメラマウスを交配することで、ヘテロ欠損マウス、更にホモ欠損マウスを作製する。 C.下等動物におけるレクチン経路の解析:マボヤ体液からN-アセチルグルコサミン結合カラムを用いて、フィコリンに相当するレクチンを2種類精製した。精製したフィコリン様レクチンをV8プロテアーゼで切断し、数カ所の部分アミノ酸配列をもとにPCRを行い、PCRで得られた産物をプローブとしてcDNAのクローニングを行った結果4種類のフィコリンが得られ、すでに得られているマボヤMBL様レクチンとは異なり、コラーゲン構造を有することが判明した(J.Biol.Chem.投稿中)。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Misao Matsushita: "Complement-activating complex of ficolin and mannose-binding lectin-associated serine protease"J.Immunol. 164. 2281-2284 (2000)
[Publications] Misao Matsushita: "Proteolytic activities of two types of manose-binding lectin-associated serine protease"J.Immunol. 165. 2637-2642 (2000)
[Publications] Steffen Thiel: "Interaction of c1q and mannan-binding lectin (MBL) with Clr,Cls,MBL-associated serine protase 1 and 2 and small"J.Immunol.. 165. 878-887 (2000)
[Publications] Morite Endo: "Complement activation through the lectin pathway in patients with Henoch-Schoen len purpura nephritis"Amr.J.Kidney Dis'. 35. 401-407 (2000)
[Publications] Tsuguro Mizuochi: "Role of galactosylation in the renal pathogenicity of murine IgG-3 monoclonal cryoglobulins"Blood. (in press). (2001)
[Publications] Shikuya A.: "Fcα/μ-u receptor mediates endocytosis of IgM-coated microbes"Nature Immunology. 1. 441-446 (2000)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

フィコリンによる補体レクチン経路の活性化機構

Principal Investigator

藤田 禎三 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (20134223)

Research Products

[Publications] Misao Matsushita: "Complement-activating complex of ficolin and mannose-binding lectin-associated serine protease"J.Immunol. 164. 2281-2284 (2000)

[Publications] Misao Matsushita: "Proteolytic activities of two types of manose-binding lectin-associated serine protease"J.Immunol. 165. 2637-2642 (2000)

[Publications] Steffen Thiel: "Interaction of c1q and mannan-binding lectin (MBL) with Clr,Cls,MBL-associated serine protase 1 and 2 and small"J.Immunol.. 165. 878-887 (2000)

[Publications] Morite Endo: "Complement activation through the lectin pathway in patients with Henoch-Schoen len purpura nephritis"Amr.J.Kidney Dis'. 35. 401-407 (2000)

[Publications] Tsuguro Mizuochi: "Role of galactosylation in the renal pathogenicity of murine IgG-3 monoclonal cryoglobulins"Blood. (in press). (2001)

[Publications] Shikuya A.: "Fcα/μ-u receptor mediates endocytosis of IgM-coated microbes"Nature Immunology. 1. 441-446 (2000)

藤田禎三福島県立医科大学, 医学部, 教授 (20134223)