SLE患者自己抗体産生B細胞でのRAG発現不全の解析とその治療応用

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12470116
• Research Institution: St. Marianna University School of Medicine
• Principal Investigator: 鈴木 登 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助教授 (40235982)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 永渕 裕子 聖マリアンナ医科大学, 難病治療研究センター, 助手 (80278001)
• Keywords: 全身性エリテマトーデス / B細胞株 / 抗DNA抗体 / RAG / EBウイルス / 抗CD40抗体

Research Abstract

本年度は、まず初めに全身性エリテマトーデス(SLE)患者の末梢血から多数のEBウイルスでトランスフォームしたB細胞株を樹立し、これらを用いて、SLE患者B細胞株でのRAG発現とCD40を初めとする種々のアクセサリー分子の発現を検討した。これらのB細胞株の一部はクローニングできたが、残りの細胞株ではクローニングが十分行えておらず、single cell levelでの抗原特異性の同定は十分行えていない。しかしながらSLE患者B細胞株ではRAG発現は様々であり、必ずしも全ての細胞においてRAG発現が亢進しているわけではなかった。この点はこれまでの他の研究室からの報告とは異なっていた。
さらにSLE患者の末梢血B細胞を高度に精製した後、DNA-ビーズとの結合性からDNA結合B細胞、すなわち抗DNA抗体産生B細胞とそれ以外を産生する非DNA結合B細胞に分画した。DNA結合B細胞では、非刺激状態でRAGの発現が低下していた。さらにDNA結合B細胞を抗CD40抗体やStaphylococcus aureus Cow an Iなどの刺激とIL-2,IL-4,Il-10などのサイトカイン刺激を組み合わせたが、どのような組み合わせでも、SLE患者末梢血抗DNA抗体産生B細胞に適切なかたちでRAGを誘導することは、難しかった。
そこで、RAG発現が低下しているEBウイルスでトランスフォームB細胞株を用いてRAG1とRAG2の発現ベクターを導入し、強制的なRAGの遺伝子発現がB細胞の抗原特異性を変えることができるのかの検討を始めている。

Research Products

• [Publications] Takeba Y,Suzuki N,Wakisaka S,Takeno M,Kaneko A,Asai T,Sakane T: "Involvement of cAMP responsive element binding protein (CREB) in the synovial cell hyperfunction in patients with rheumatoid arthritis."Clin.Exp.Rheumtol.. 18. 47-55 (2000)
• [Publications] Wakisaka S,Suzuki N,Kaneko A,Asai T,Sakane T: "Characterization of tissue outgrowth developed in vitro in patients with rheumatoid arthritis ; involvement of T cells for the development of tissue outgrowth."Int.Arch.Allergy Immunol.. 121. 68-79 (2000)
• [Publications] Sakane T,Suzuki N: "Possible correction of abnormal rheumatoid arthritis synovial cell function by jun D transfection in vitro."Arthritis Rheum.. 43. 945-946 (2000)
• [Publications] Sakane T,Takeno M,Suzuki N: "Behcet's disease."N.Engl.J.Med.. 342. 588-589 (2000)
• [Publications] Sakane T,Suzuki N : "Neuro-endocrine-immune Axis in human rheumatoid arthritis."Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis. 48. 417-427 (2000)
• [Publications] Yokoe T,Suzuki N,Minoguchi K,Adachi M and Sakane T.: "Analysis of IL-12 receptor β2 chain expression of circulating T lymphocytes in patients with atopic asthma."Cell.Immunol.. (In press). (2001)
• [Publications] Sakane T,Suzuki N: "Behcet's syndrome. In The Molecular Pathology of Autoimmunity (Second Edition)"Gordon and Breach Science(In press). (2001)
• [Publications] Sakane T,Suzuki N: "Neuro-endocrine-immune axis in human rheumatoid arthritis."Kluwer Academic Publishers (In press). (2001)