2002 Fiscal Year Annual Research Report

Leukotoxin代謝系の解明と代謝物による細胞傷害の分子生物学的研究

Research Project

Project/Area Number	12470135
Research Institution	Fukui Medical University
Principal Investigator	石崎武志福井医科大学, 医学部, 教授 (80151364)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	飴嶋慎吾福井医科大学, 医学部附属病院, 講師 (60262614) 松川茂福井医科大学, 医学部, 助教授 (00092809)
Keywords	ロイコトキシン / リノール酸 / cyclin dependent kinase inhibitor / cell cycle / P16 INK4a / senescence
Research Abstract	平成13年度に引き続きロイコトキシン(Lx)の細胞周期停止機構について検討を加えた。培養ヒト肺動脈血管内皮細胞(HPEAC)を用いてLxの細胞増殖抑制効果と細胞老化効果とを、それぞれ、1)cyclin dependent kinase inhibitor(CDKI)の一つであるp16INK4aのantisense(antisense p16 INK4aS-oligo)添加の有無で検討した。2)senescence-associated(SA)-β galactosidase染色で検討した。結果;1)Lxの添加によりHPEACの細胞周期はG1期で停止した。そして、antisense p16 INK4aSoligo処置や添加したLxの除去によってDNA合成能は回復した。Lx投与によりp16INK4aのmRNA発現量は48時間後に約3倍、96時間後に約4倍に増加したが、antisense p16 INK4aS-oligo処置や添加したLxの除去によってその増加は有意に抑制された。また、P16INK4aの蛋白量もLx添加で増加し、antisense p16 INK4aS-oligo処置や添加したLxの除去により増加は認められなかった。 2)HPEACは継代毎にSA-β galactosidase染色陽性細胞が増加し、PD50を超えると細胞増殖能はほとんど失われた。が、Lxの添加によりSA-β galactosidase染色陽性細胞は有意に減少した。Lxとantisense p16 INK4aS-oligo両者の添加によってSA-β galactosidase染色陽性細胞は増加した。以上の実験成績は、LxがHPEACの増殖抑制作用を示すと同時に細胞老化にも抑制的に働いている可能性を示唆するものである。

Research Products
(2 results)

All Publications (2 results)

[Publications] S Okamura, T Ishizaki, et al.: "Leukotoxin-activated human pulmonary artery endothelial cell produces nitric oxide and superoxide anion"Puim.Pharmacol.& Ther.. 15(1). 25-33 (2002)
[Publications] Wakabayashi K, Ishizaki T, et al.: "A linoleate epoxide, leukotoxin, 9,10-epoxy-12-octadecenoate causes premature senescence-like effect on pulmonaru arterial endothelial cells"Am.J, Respir.Crit.Care.Med.. 165(8). A371 (2002)