2001 Fiscal Year Annual Research Report

心筋細胞のミトコンドリア機能:筋小胞体とのcross-talkと細胞障害への関与

Research Project

Project/Area Number	12470151
Research Institution	Hamamatsu University School of Medicine
Principal Investigator	林秀晴浜松医科大学, 医学部, 教授 (50135258)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	加藤秀樹浜松医科大学, 医学部, 助手 (80314029)
Keywords	Diazoxide / 共焦点レーザー顕微鏡 / ミトコンドリア / ミトコンドリア内Ca^<2+>濃度 / rhod-2 / Saponin / permeability transition pore / 細胞保護効果
Research Abstract	Diazoxideの心筋保護作用機構を検討するために、これまで共焦点レーザー顕微鏡を用いて、Diazoxideがミトコンドリア(Mito)のpermeability transition pore (PTP)を介するCa^<2+>放出を引き起こし、Ca^<2+> sparkとCa^<2+> transientを増大させることを示した。今回は、ミトコンドリア内のCa^<2+>濃度([Ca^<2+>]_m)の測定法を確立して、Diazoxideの[Ca^<2+>]_mに対する作用を検討した。方法は、ラット心室筋細胞を蛍光色素のrhod-2/AM (20μM)を負荷してsaponin(0.05mg/ml)で細胞膜をpermeabilizeし、514nmで励起時の>560nmでの蛍光から[Ca^<2+>]_mを測定した。(1)Mitotracker greenと同時に染色すると、permeabilizeした細胞ではrhod-2とMitotracker greenはoverlapした。(2)灌流液の濃度を177mM、300mM、600mMと変化させると、[Ca^<2+>]_mは変化したが、Ruthenium red (Ca^<2+> uniporterの阻害薬)またはFCCP(脱共役剤)を前投与することにより[Ca^<2+>]_mは上昇しなかった。(3)Diazoxide (1, 10, 50μM)は、濃度依存性に[Ca^<2+>]_mを減少させた。以上より、Rhod-2とsaponinを用いることにより、[Ca^<2+>]_mを測定できることが示された。またDiazoxideは、PTPを介したCa^<2+>放出により[Ca^<2+>]_mを減少させて細胞保護効果を起こすことが示唆された。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Shiho Sugiyama et al.: "The importance of glycolytically-derived ATP for the Na^+/H^+ exchange activity in guinea pig ventricular myocytes"Mol. Cell. Biochem.. 217. 153-161 (2001)
[Publications] Satoru Ito et al.: "Possible involvement of Rho kinase in Ca^<2+> sensitization and mobilization by Mch in tracheal smooth muscle"Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 280. L1218-L1224 (2001)
[Publications] Hiroshi Satoh et al.: "Importance of glycolytically derived ATP for Na^+ loading via Na^+/H^+ exchange during metabolic inhibition in guinea pig ventricular myocytes"Clinical Science. 101. 243-251 (2001)
[Publications] Quang-Kin Tran et al.: "Insulin inhibits coronary endothelial Cell calcium entry and coronary artery relaxation"J. Cardiovasc. Pharmacol.. 38. 885-892 (2001)
[Publications] Tsuyoshi Sugiyama et al.: "Involvement of CCAAT/enhancer-binding protein in regulation of the rat serine : pyruvate/alanine : glyoxylate aminotransferase gene expression"FEBS Letters. 508. 16-22 (2001)
[Publications] 林秀晴他: "カルシウム感受性色素を用いた心筋カルシウムシグナリング"Jpn. J. Electrocardiology. 21(Supl.2). S-2-15-S-2-32 (2001)

2001 Fiscal Year Annual Research Report

心筋細胞のミトコンドリア機能:筋小胞体とのcross-talkと細胞障害への関与

Principal Investigator

林 秀晴 浜松医科大学, 医学部, 教授 (50135258)

Research Products

[Publications] Shiho Sugiyama et al.: "The importance of glycolytically-derived ATP for the Na^+/H^+ exchange activity in guinea pig ventricular myocytes"Mol. Cell. Biochem.. 217. 153-161 (2001)

[Publications] Satoru Ito et al.: "Possible involvement of Rho kinase in Ca^<2+> sensitization and mobilization by Mch in tracheal smooth muscle"Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 280. L1218-L1224 (2001)

[Publications] Hiroshi Satoh et al.: "Importance of glycolytically derived ATP for Na^+ loading via Na^+/H^+ exchange during metabolic inhibition in guinea pig ventricular myocytes"Clinical Science. 101. 243-251 (2001)

[Publications] Quang-Kin Tran et al.: "Insulin inhibits coronary endothelial Cell calcium entry and coronary artery relaxation"J. Cardiovasc. Pharmacol.. 38. 885-892 (2001)

[Publications] Tsuyoshi Sugiyama et al.: "Involvement of CCAAT/enhancer-binding protein in regulation of the rat serine : pyruvate/alanine : glyoxylate aminotransferase gene expression"FEBS Letters. 508. 16-22 (2001)

[Publications] 林 秀晴他: "カルシウム感受性色素を用いた心筋カルシウムシグナリング"Jpn. J. Electrocardiology. 21(Supl.2). S-2-15-S-2-32 (2001)

林秀晴浜松医科大学, 医学部, 教授 (50135258)

[Publications] 林秀晴他: "カルシウム感受性色素を用いた心筋カルシウムシグナリング"Jpn. J. Electrocardiology. 21(Supl.2). S-2-15-S-2-32 (2001)