2002 Fiscal Year Annual Research Report

癌抑制遺伝子導入による放射線・温熱治療の増感

Research Project

Project/Area Number	12470189
Research Institution	Nara Medical University
Principal Investigator	大西武雄奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (60094554)
Keywords	遺伝子治療 / p53 / 放射線 / 温熱 / 抗癌剤 / アポトーシス / 遺伝子導入 / DNAラダー
Research Abstract	【目的】p53蛋白質は細胞に与えられたストレスに応じて活性化されアポトーシスを誘導する。このp53蛋白質の働きを利用することにより効率の良い癌治療が期待でき、変異型p53癌細胞あるいはp53遺伝子欠損癌細胞に対しては、正常型p53遺伝子導入と放射線・温熱との併用が治療効果の向上につながる。本研究では過剰発現させた正常型p53蛋白質を放射線・温熱により活性化させ効率良くアポトーシスを誘導し、癌細胞の放射線・温熱感受性を高めることを目的とした。【方法】p53欠損ヒト肺癌細胞H1299に正常型p53遺伝子を導入し、過剰発現させた細胞(H1299/wtp53)あるいは変異部位の異なる変異型p53遺伝子(codon 175, Arg→His ; codon 248, Arg→Trp ; codon 273, Arg→His)を導入し、p53蛋白質を過剰発現させた細胞(H1299/mp53)を用いて、放射線・温熱感受性とアポトーシス誘導を調べた。さらに、p53欠損ヒト肺癌細胞H1299及び白血病細胞HL60をヌードマウスに移植し、エレクトロポレーション法で正常型p53遺伝子導入を試みた。【結果】H1299/wtp53細胞の放射線受性はどのタイプのH1299/mp53細胞よりも高くなった。また、neoコントロールベクターのみを導入したH1299/neo細胞はH1299/mp53細胞と同程度の放射線感受性を示した。さらに、DNAラダー検出法及びヘキスト染色法で放射線誘導アポトーシスの出現頻度を調べたところ、H1299/wtp53細胞の方がH1299/mp53細胞よりもアポトーシスの出現頻度は高い傾向を示した。ヌードマウスへの癌細胞の移植は成功したが、良好な遺伝子導入の結果を得られなかった。【考察】正常型p53遺伝子あるいは変異型p53遺伝子を導入したp53欠損癌細胞の実験系において、癌細胞の放射線感受性は正常型p53蛋白質に依存していることが確認できた。さらに、p53遺伝子導入H1299細胞を用いて放射線増感とアポトーシスとの関係についても調べた結果、正常型p53蛋白質を過剰発現させた細胞では放射線誘導アポトーシスの出現頻度が高いことが分かった。今回のエレクトロポレーション法による移植腫瘍への効率的な遺伝子導入がむずかしかった要因を今後検討する必要がある。【結論】p53遺伝子欠損あるいは変異型p53を持つ癌細胞においても、p53遺伝子導入により正常型p53蛋白質が持つ機能を発揮させ、正常型p53蛋白質を持つ癌細胞と同程度の放射線による殺細胞効果が期待できる可能性が強く示唆された。

Research Products
(17 results)

All Other

All Publications (17 results)

[Publications] Yasumoto, J., et al.: "Analysis of apoptosis-related gene expression after X-ray irradiation in human tongue squamous cell carcinoma cells harboring wild-type or mutation-type p53 gene"J. Rad. Res.. (in press). (2003)
[Publications] Harima, Y, et al.: "Expression of Ku8O in cervical cancer correlates with response to radiotherapy and survival"Amer. J. Clin. Oncol.. (in press). (2003)
[Publications] Masunaga S, et al.: "Usefulness of combined treatment with mild hyperthermia and/or tirapazamine in the treatment of solid tumors : its independence of p53 status"Cancer Science. (in press). (2003)
[Publications] Takahashi, A., et al.: "p53-Dependent hyperthermic enhancement of tumor growth inhibition by X-ray or carbon-ion beam irradiation"Int. J. Hyperthermia. (in press). (2003)
[Publications] Takahashi, A., et al.: "Radiation-induced apoptosis in scid mouse spleen after low dose-rate irradiation"Int. J. Radiat. Biol.. 78. 689-693 (2002)
[Publications] Harima, Y, et al.: "Human papilloma virus (HPV) DNA associated with prognosis of cervical cancer after radiotherapy"Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys.. 52. 1345-1351 (2002)
[Publications] Harima, Y, et al.: "Mutation of the PTEN gene in advanced cervical cancer correlated with tumor progression and poor outcome after radiotherapy"Int. J. Oncol.. 18. 493-497 (2002)
[Publications] Masunaga, S., et al.: "Impact of p53 status of the tumor cells on the effect of reactor neutron beam Irradiation with emphasis on the response of intratumor quiescent cells"Jpn. J. Cancer Res.. 93. 1366-1377 (2002)
[Publications] Ohnishi, K., et al.: "Glycerol as a chemical chaperone enhanced radiation-induced apoptosis in anaplastic thyroid carcinoma cells"Mol. Cancer. 1. 4 (2002)
[Publications] Asakawa, I., et al.: "Growth inhibition in transplanted human tongue tumors bearing different p53 gene status with X-ray or C-beam irradiation"Anticancer Res.. 22. 2037-2043 (2002)
[Publications] Ohnishi, K., et al.: "Transfection of mutant p53 gene depresses X-ray-and CDDP-induced apoptosis in a human squamous cell carcinoma of the head and neck"Apoptosis. 7. 367-372 (2002)
[Publications] Ohnishi, T., et al.: "Glycerol restores heat-induced p53-dependent apoptosis of human glioblastoma cells bearing mutant p53"BioMed. Biotechnol.. 2. 6 (2002)
[Publications] Masunaga, S., et al.: "Radiobiological characteristics of solid tumours depending on the p53 status of the tumour cells, with emphasis on the response of intratumour quiescent cells"Eur. J. Cancer. 18. 718-727 (2002)
[Publications] 大西健他: "集学的癌治療の研究と臨床"篠原出版新社. 7 (2002)
[Publications] 太田一郎他: "癌放射線療法2002"篠原出版新社. 12 (2002)
[Publications] 村山千恵子他: "集学的癌治僚の研究と臨床"篠原出版. 9 (2002)
[Publications] 玉本哲郎他: "癌の臨床"篠原出版. 9 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

癌抑制遺伝子導入による放射線・温熱治療の増感

Principal Investigator

大西 武雄 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (60094554)

Research Products

[Publications] Yasumoto, J., et al.: "Analysis of apoptosis-related gene expression after X-ray irradiation in human tongue squamous cell carcinoma cells harboring wild-type or mutation-type p53 gene"J. Rad. Res.. (in press). (2003)

[Publications] Harima, Y, et al.: "Expression of Ku8O in cervical cancer correlates with response to radiotherapy and survival"Amer. J. Clin. Oncol.. (in press). (2003)

[Publications] Masunaga S, et al.: "Usefulness of combined treatment with mild hyperthermia and/or tirapazamine in the treatment of solid tumors : its independence of p53 status"Cancer Science. (in press). (2003)

[Publications] Takahashi, A., et al.: "p53-Dependent hyperthermic enhancement of tumor growth inhibition by X-ray or carbon-ion beam irradiation"Int. J. Hyperthermia. (in press). (2003)

[Publications] Takahashi, A., et al.: "Radiation-induced apoptosis in scid mouse spleen after low dose-rate irradiation"Int. J. Radiat. Biol.. 78. 689-693 (2002)

[Publications] Harima, Y, et al.: "Human papilloma virus (HPV) DNA associated with prognosis of cervical cancer after radiotherapy"Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys.. 52. 1345-1351 (2002)

[Publications] Harima, Y, et al.: "Mutation of the PTEN gene in advanced cervical cancer correlated with tumor progression and poor outcome after radiotherapy"Int. J. Oncol.. 18. 493-497 (2002)

[Publications] Masunaga, S., et al.: "Impact of p53 status of the tumor cells on the effect of reactor neutron beam Irradiation with emphasis on the response of intratumor quiescent cells"Jpn. J. Cancer Res.. 93. 1366-1377 (2002)

[Publications] Ohnishi, K., et al.: "Glycerol as a chemical chaperone enhanced radiation-induced apoptosis in anaplastic thyroid carcinoma cells"Mol. Cancer. 1. 4 (2002)

[Publications] Asakawa, I., et al.: "Growth inhibition in transplanted human tongue tumors bearing different p53 gene status with X-ray or C-beam irradiation"Anticancer Res.. 22. 2037-2043 (2002)

[Publications] Ohnishi, K., et al.: "Transfection of mutant p53 gene depresses X-ray-and CDDP-induced apoptosis in a human squamous cell carcinoma of the head and neck"Apoptosis. 7. 367-372 (2002)

[Publications] Ohnishi, T., et al.: "Glycerol restores heat-induced p53-dependent apoptosis of human glioblastoma cells bearing mutant p53"BioMed. Biotechnol.. 2. 6 (2002)

[Publications] Masunaga, S., et al.: "Radiobiological characteristics of solid tumours depending on the p53 status of the tumour cells, with emphasis on the response of intratumour quiescent cells"Eur. J. Cancer. 18. 718-727 (2002)

[Publications] 大西健 他: "集学的癌治療の研究と臨床"篠原出版新社. 7 (2002)

[Publications] 太田一郎 他: "癌放射線療法2002"篠原出版新社. 12 (2002)

[Publications] 村山千恵子 他: "集学的癌治僚の研究と臨床"篠原出版. 9 (2002)

[Publications] 玉本哲郎 他: "癌の臨床"篠原出版. 9 (2002)

大西武雄奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (60094554)

[Publications] 大西健他: "集学的癌治療の研究と臨床"篠原出版新社. 7 (2002)

[Publications] 太田一郎他: "癌放射線療法2002"篠原出版新社. 12 (2002)

[Publications] 村山千恵子他: "集学的癌治僚の研究と臨床"篠原出版. 9 (2002)

[Publications] 玉本哲郎他: "癌の臨床"篠原出版. 9 (2002)