2001 Fiscal Year Annual Research Report
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12470204
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| Research Institution | Jichi Medical University |
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Principal Investigator |
小松 則夫 自治医科大学, 医学部, 助教授 (50186798)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
外島 正樹 自治医科大学, 医学部, 助手 (00306151)
内田 美栄 自治医科大学, 医学部, 助手 (80316520)
桐戸 敬太 自治医科大学, 医学部, 助手 (90306150)
柏井 良文 自治医科大学, 医学部, 助手 (10271222)
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| Keywords | FKHRL1 / トランスジェニックマウス / GATA-1 / Stat1 / 赤血球造血 / 巨核球造血 / CD34 |
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| Research Abstract |
我々は今までに白血病細胞株を用いてエリスロポエチン刺激によってStat1、Stat3、Stat5が活性化されることを明らかにしてきた。さらに昨年度の研究で赤血球・巨核球系に特異的に発現するGATA-1のプロモーターにStat3ドミナントネガティブ型(Stat3F)を連結させたコンストラクトを用いてトランスジェニック(Tg)マウス(Stat3FTgマウス)を作製し、Stat3の巨核球系前駆細胞増幅における重要な機能を明らかにした。今年度はStat3FTgマウスとStat1ノックアウト(Stat1-/-)マウスとの交配によりStat3FTg::Stat-/-マウスを作製し、Stat3FTgマウスおよびStat1-/-マウスを比較検討し、Stat1およびStat3の赤血球造血における機能を解析した。その結果、これらのマウスは定常状態ではヘモグロビン値は正常であったが、フェニルヒドラジンによる溶血発作誘発後あるいは5-FU投与による骨髄抑制からの赤血球造血の回復において、Stat1-/-マウスおよびStat3FTg::Stat1-/-マウスではコントロールに比して、ヘモグロビン値の明らかな遅延が認められた。以上の結果からStat1は赤血球系前駆細胞の急激な増幅に重要な役割を果たしていることが明らかになった。さらにForkhead転写因子FKHRL1の造血における機能を明らかにするために、ヒト臍帯血由来CD34陽性細胞への活性型FKHRL1cDNA遺伝子導入実験を行い、形成される赤芽球コロニーおよび顆粒球・マクロファージコロニーの数が有意に減少することがわかった。現在GATA-1の発現調節領域の下流に活性化FKHRL1を連結させたコンストラクトを用いてTgマウスを樹立し、現在解析を行っている。
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[Publications] Uchida, M.: "A functional role of mitogen-activated protein kinaze, Erk1 and Erk2, in the differentiation of a human leukemia cell line UT-7/GM : a possible key factor for cell fate determination toward erythroid and megakaryocytic lineages"Int Haematol. 73. 78-83 (2001)
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[Publications] Tanaka, M.: "Forkhead family transcription factor FKHRL1 is expressed in human megakaryocytes and regulates cell cycling as a downstream molecule of TPO signaling"J Biol Chem. 276. 15082-15089 (2001)
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[Publications] Ohmine, K.: "Characterization of stage progression in chronic myeloid leukemia by DNA microarray with purified hematopoietic stem cells"Oncogene. 20. 8249-8257 (2001)
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[Publications] Matsubara, S.: "Enzyme-cytochemically detectable glucose-6-phosphate dehydrogenase in human villous macrophage(Hofbauser cells)"Placenta. 22(10). 882-885 (2001)
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[Publications] Kirito, K.: "Identification of the human erythropoietin receptor region required for Stat1 and Stat3 activation"Blood. 99. 102-110 (2002)
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[Publications] Kirito, K.: "Constitutive activation of Stat1 and Stat3 in primary erythroleukemia cells"Int J Hematol. 75. 51-54 (2002)
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[Publications] Kirito, K.: "A Functional role of Stat3 in in vivo megakaryopoiesis"Blood. (in press).
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[Publications] Kirito, K.: "TPO regulates Bcl-xL gene expression through Stat5 and phosphatidylinositol-3-kinase activation pathways"J Biol Chem. (in press).
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[Publications] Otsuki, T.: "Phosphorylation of Fanconi anemia protein, FANCA, is regulated by Akt kinase"Biochem Biophys Res Commun. (in press).
