2000 Fiscal Year Annual Research Report

肝再生開始機構における"ずり応力"の分子生物学的役割の解明と肝再生促進への応用

Research Project

Project/Area Number	12470262
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	飯室勇二京都大学, 医学研究科, 助手 (30252018)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山本雄造京都大学, 医学研究科, 講師 (70281730) 嶌原康行京都大学, 医学研究科, 助教授 (30196498) 山岡義生京都大学, 医学研究科, 教授 (90089102) 山本成尚京都大学, 医学研究科, 助手 (30253298)
Keywords	ずり応力 / Rac1 / 肝再生 / 肝虚血再灌流障害 / 遺伝子導入
Research Abstract	肝再生開始機構におけるずり応力の役割を検討すべく、in vitroにおいて肝細胞、クッパ-細胞、類洞内皮細胞を分離培養し、安定したviabilityを得るまでに至った。これらの細胞にずり応力負荷をかける予定であるが、現在その段階にまで至っていない。また、ずり応力によるシグナル伝達に関与することが予想されるRho GTPaseについて検討すべく、まず変異体Rac1(ドミナントネガティブ)発現アデノウイルス、Ad5N17Rac1をラット線維芽細胞(Rat2)に感染させ、感染細胞を使ったWestern Blotにより、組換えアデノウイルスによる効率的なN17Rac1の発現を確認した。今後、前述の肝細胞、クッパ-細胞、類洞内皮細胞に同様にAd5N17Rac1を感染させその導入効率を確認後、ずり応力負荷を行いたい。一方、肝切除後肝再生モデルにおける検討を行う前に、in vivoにおけるN17Rac1導入効率を検討した。雄性SDラットにAd5N17Rac15x10^5pfu/ratを尾静脈より投与し、72時間後に肝臓を採取し、そのホモジネートを用いたWestern Blot法により、in vivoにおけるN17Rac1の蛋白発現を確認した。また、実際にin vivoにおいてN17Rac1蛋白がRac1活性を抑制しているかを検討する目的で、これまでにin vitroを中心に報告されているN17Rac1蛋白の低酸素再酸素化モデルにおける肝細胞障害の軽減効果を、in vivoにて検討した。つまり、正常ラット、Ad5LacZ感染ラット、およびAd5N17Rac1感染ラットにおいて20分の全肝虚血後再潅流を行い、経時的に肝細胞障害を評価した。N17Rac1発現ラットにおいてのみ、著明な肝細胞障害抑制効果を認め、in vivoで発現したN17Rac1が有効に働くことが証明された。今後、肝再生に対する影響を検討する。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Iimuro Yuji et al.: "Signal transduction through integrin is a main mechanism for hepatocyte proliferation by overexpression of matrix metalloproteinase-1 in the rat."Hepatology. 32・4. 321A-321A (2000)
[Publications] Iimuro Yuji et al.: "Expression of a Rac1-superrepressor in the liver blocked ischemia/reperfusion injury in the rat"European Surgical Research. 32・suppl1. 1-1 (2000)
[Publications] 飯室勇二他: "MMP-1遺伝子導入による既存肝線維化の治療"Bio Clinica. 16・4. 330-334 (2001)
[Publications] Iimuro Yuji et al.: "Clinicopathologic evaluation of hepatocellular carcinoma with bile duct thrombi."Surgery. 128・5. 779-783 (2000)
[Publications] Iimuro Yuji et al.: "The mitochondrial permeability transition augments Fas-induced apoptosis in mouse hepatocytes."J Biol Chem. 275・16. 11814-11823 (2000)
[Publications] 飯室勇二他: "最新肝臓病学:全国現状調査から将来展望まで"マトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)-1強制発現による肝線維化の治療および肝細胞増殖の強制開始. 5 (2001)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

肝再生開始機構における"ずり応力"の分子生物学的役割の解明と肝再生促進への応用

Principal Investigator

飯室 勇二 京都大学, 医学研究科, 助手 (30252018)

Research Products

[Publications] Iimuro Yuji et al.: "Signal transduction through integrin is a main mechanism for hepatocyte proliferation by overexpression of matrix metalloproteinase-1 in the rat."Hepatology. 32・4. 321A-321A (2000)

[Publications] Iimuro Yuji et al.: "Expression of a Rac1-superrepressor in the liver blocked ischemia/reperfusion injury in the rat"European Surgical Research. 32・suppl1. 1-1 (2000)

[Publications] 飯室勇二 他: "MMP-1遺伝子導入による既存肝線維化の治療"Bio Clinica. 16・4. 330-334 (2001)

[Publications] Iimuro Yuji et al.: "Clinicopathologic evaluation of hepatocellular carcinoma with bile duct thrombi."Surgery. 128・5. 779-783 (2000)

[Publications] Iimuro Yuji et al.: "The mitochondrial permeability transition augments Fas-induced apoptosis in mouse hepatocytes."J Biol Chem. 275・16. 11814-11823 (2000)

[Publications] 飯室勇二 他: "最新 肝臓病学:全国現状調査から将来展望まで"マトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)-1強制発現による肝線維化の治療および肝細胞増殖の強制開始. 5 (2001)

飯室勇二京都大学, 医学研究科, 助手 (30252018)

[Publications] 飯室勇二他: "MMP-1遺伝子導入による既存肝線維化の治療"Bio Clinica. 16・4. 330-334 (2001)

[Publications] 飯室勇二他: "最新肝臓病学:全国現状調査から将来展望まで"マトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)-1強制発現による肝線維化の治療および肝細胞増殖の強制開始. 5 (2001)