悪性脳腫瘍に対する熱作動性サイトカイン遺伝子導入による局所温熱遺伝子療法の開発

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12470286
• Research Institution: Niigata University
• Principal Investigator: 田中 隆一 新潟大学, 脳研究所, 教授 (30018816)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 森 宏 新潟大学, 脳研究所, 講師 (70291359) ; 高橋 英明 新潟大学, 医学部・附属病院, 講師 (70236305)
• Keywords: hyperthermia / heat shock protein / gene terapy

Research Abstract

1)in vitroの実験系として、hsp-lacZ、hsp-CD40 ligand、hsp-EGFPのplasmidを作成し、これらが熱刺激で発現することを確認した。
また、これらのplasmidをhuman(U251)およびrat(C6、RSV、SRB)のglioma cellに導入して、熱刺激による発現率を検討しているところである。
至適温度、加温条件については、39℃〜43℃までの間、1℃間隔で、時間は15分、30分、45分、60分、90分、120分とし、これらを組み合わせて最もよく発現する条件を検討している。
この後、IL-12、IFN-γ、p53などを導入し、熱刺激による殺細胞効果を検討する予定である。また、Glioma細胞の他にmelanoma細胞でも同様の検討を行う予定である。
2)上記で得られた細胞が産生するcytokineの量を測定し、Cytokineの発現がglioma細胞に及ぼす効果を細胞増殖能、apoptosis発現の有無、MHC分子、接着因子などの面から検討する。この後、遺伝子導入細胞をratの脳内、皮下に接種し、生着後温熱治療を行い、腫瘍組織の変化、殺細胞効果について検討する。