2002 Fiscal Year Annual Research Report
悪性脳腫瘍に対する熱作動性サイトカイン遺伝子導入による局所温熱遺伝子療法の開発
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12470286
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
田中 隆一 新潟大学, 脳研究所, 教授 (30018816)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
森 宏 新潟大学, 脳研究所, 教授 (70291359)
高橋 英明 新潟大学, 医学部附属病院, 講師 (70236305)
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| Keywords | heat shock promotor / heat shock protein 70 / gene therapy / hyperthermia / glioma / interferon-pamma |
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| Research Abstract |
<背景>我々はこれまでに、heat shock protein 70 (hsp70) promoterによりLacZ reporter geneを発現するconstruct (hsp70/LzcZ)を作成し、これをhuman glioma cell lines (U251-MG,T98G,NP1,NP2)及びmouse 203 glioma cell lineに導入しstable transfectantを得た後、加温(41℃2時間、42℃1時間、43℃1時間)後3〜72hのβ-galactosidaseの発現を測定した。その結果、主に加温3〜24時間後をピークとする発現を認めた。しかし、細胞株により発現程度の相違が見られ、U251-MG細胞では、37℃でも発現がみられた。
<方法>上記結果を踏まえ今年度は、抗腫瘍性サイトカインであるIFN-γを、heat shockをswitchとして発現させるため、hsp70 promoterによるconstruct (hsp70/IFN-γ)を作成した。それをinuvitroで、株化細胞(mouse 203 glioma cell)にlipofection法により遺伝子導入し、stable transfectant (hsp70/IFN-γ/203)を樹立した。この遺伝子導入細胞を用いて、42℃1時間の加温後(12,24,48,72時間)の培養上清中IFN-γの発現変化を、ELISA法にて測定し、37℃controlのそれと比較検討した。
<結果>IFN-γは加温24時間後に最も強力に発現した。37℃では、発現を認めなかった。
<結論>mouse glioma 203細胞での、hsp70 promoterによるIFN-γの発現は、37℃では、発現を認めない一方、42℃1時間加温により直後〜24時間後にピークをもつ発現を示し、heat shockをswitchとするheat-inducible gene therapyとして有用な可能性が示された。
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[Publications] 田中 隆一: "VIII.温熱療法悪性グリオーマの温熱療法"In : 脳神経外科Advanced Practice 5、神経膠腫. 136-141 (2002)
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[Publications] 田中 隆一: "脳腫瘍の温熱療法 : 悪性グリオーマのRF組織内加温法"In : 集学的癌治療の研究と臨床,監修. 305-313 (2002)
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[Publications] H.Takahashi: "Successful Treatments of Malignant Glioma in the Elderly by Radiofrequency Interstitial Hyperthemia: A Report of TWo Cases"Jpn J Hyperthermic Oncol. 18(3). 157-167 (2002)
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[Publications] 田中 隆一: "第7章 温熱療法 最近の進歩"In : 先端医療シリーズ18、脳腫瘍の最新医療. 227-231 (2003)
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[Publications] 高橋 英明: "第7章 温熱療法 RF組織内温熱療法"In : 先端医療シリーズ18、脳腫瘍の最新医療. 232-238 (2003)
