単球系細胞が産生するTNF-αの新規転写因子を制御することによる歯周炎治療

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12470471
• Research Institution: OKAYAMA UNIVERSITY
• Principal Investigator: 高柴 正悟 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教授 (50226768)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 前田 博史 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (00274001) ; 明貝 文夫 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (50263588) ; 西村 英紀 岡山大学, 歯学部・附属病院, 講師 (80208222)
• Keywords: 歯周炎 / 腫瘍壊死因子 / 遺伝子転写制御 / 局所遺伝子導入 / 抗炎症療法

Research Abstract

グラム陰性菌の内毒素であるLPSの刺激を受けた単球系細胞が腫瘍壊死因子アルファ(TNF-α)を産生して、炎症を進行とそれに伴う組織の破壊が生ずる。これは,歯周病に罹患した歯周組織でも同様である。そこで,TNF-αの産生を制御する試みとして、THF-α遺伝子の転写に関わるが,細胞の他の活性にも強く関わるNF-κBではなく,我々が新規に得たLPS誘導性の転写因子であるLITAF(LPS-induced TNF-α factor)を用いて,TNF-α遺伝子の転写を制御しようとした。LITAFの産生をLITF遺伝子のアンチセンス・オリゴヌクレオチドを用いて抑制することTNF-αの遺伝子転写が抑制されることはわかっている。
LITAF遺伝子の転写に関わるプロモーター領域の塩基配列を解析して,LITAFの遺伝子転写に関わるLPS誘導性の転写因子の候補を推定するとともに,レポーター遺伝子を用いてLPSが強く関わるLITAF遺伝子の転写に必要なプロモーター領域を明らかにできた。一方でLPS刺激をうけた単球内では細胞質内に、広く存在していたLITAFか核内に集積してくることを,免疫染色と免疫ブロット法で明らかにした。
さらに,NF-κBの抑制因子の一つであるIκB-αの変異体遺伝子を単球に導入して、NF-κBが関与しない条件下でのLITAFのTNF-α産生への影響度を検討するとともに、LITAFの抑制効果を検討する実験系を樹立した。現段階では系の樹立にとどまっているが、本研究機関の終了後にあっても,この系を用いてTNF-α産生に対するLITAFの作用の度合いとその抑制効果を検討する予定である。

Research Products

• [Publications] Shiomi N, 他: "Regulation of LITAF transcription in monocytes"Journal of Dental Research. 81巻・(Special Issue)(予定). (2002)
• [Publications] Mineshiba F, 他: "Induction of human β-defensin-2 in human gingival fibroblasts by gene transfer"Journal of Dental Research. 80巻・(Special Issue). 679-679 (2001)
• [Publications] 塩見信行, 他: "LPS刺激時のヒト単球におけるTNF-α新規転写因子の発現制御に関する研究"日本歯科保存学雑誌. 44巻・(春期特別号). 34-34 (2001)