2001 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト胎児肝に特異的に発現しているCYP3A7の発現調節機構に関する研究

Research Project

Project/Area Number	12470491
Research Institution	Hokkaido University
Principal Investigator	鎌滝哲也北海道大学, 大学院・薬学研究科, 教授 (00009177)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	藤田健一北海道大学, 大学院・薬学研究科, 助手 (60281820)
Keywords	P450 / 胎児 / CYP3A7 / CYP3A5 / CYP3A4 / ヒト肝 / 発現調節 / 個人差
Research Abstract	CYP3A7はヒト胎児肝における主要なCYP分子種であり,デヒドロエピアンドロステロン3-硫酸抱合体やレチノイン酸などの内因性ホルモンの代謝に関与している.CYP3A7はまた,アフラトキシンB_1などのがん原物質の代謝的活性化にも関与しており,生理学的にもまた毒性学的にもヒト胎児における重要な酵素であると言える.興味深いことに,CYP3A7の発現は出生後徐々に減少し,成人肝においてはほとんど認められなくなる.また,CYP3A7の発現が肝がん発症時に再活性化されるとの報告もある.これらの知見から,CYP3A7の発現を制御する分子機構もまたヒト胎児の発生および肝がんの発症に重要な役割を果たしている可能性が推測された.そこで本研究では,ヒト胎児に特異的に発現するCYP3A7遺伝子の発現制御機構を解明することを目的とした.胎児肝細胞の特徴を有するヒト肝がん由来HepG2細胞を用いてCYP3A7遺伝子の5'-上流領域の転写活性化能をルシフェラーゼアッセイにより調べた結果,CYP3A7遺伝子の発現には5'-上流約-2.3kbに存在するNF-κB様の配列(3A7κBエンハンサーと命名)が重要であることが明らかとなった.HepG2細胞より調整した核抽出液を用いてゲルシフトアッセイを行ったところ,3A7κBエンハンサーには,Sp1/Sp3,LSFおよびp53など複数の転写因子が結合することがわかった.また,Sp1/Sp3およびLSFは発現しているがp53を欠損しているヒト肝がん由来Hep3B細胞においては3A7κBエンハンサーによる転写活性化は認められず,Hep3B細胞に野生型p53発現プラスミドを導入することにより転写活性は約100倍上昇した.以上の結果から,3A7κBエンハンサーの活性化およびCYP3A7遺伝子の発現にはp53が中心的な役割を果たしていることが示唆された.

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Fujita, K. et al.: "Predicting the Mutagenicity of Tobacco-related N-Nitrosamines in Humans Using Eleven Strains of Salmonella Typhimurium YG7108 Each Co-expressing a Form of Human Cytochrome P450 with NADPH-cytochrome P450 Reductase"Environ.Mol.Mutagen.. 38. 339-346 (2001)
[Publications] Fujita, K. et al.: "Construction of Salmonella typhimurium YG7108 strains, each coexpressing a form of human cytochrome P450 with NADPH-cytochrome P450 reductase"Environ.Mol.Mutagen.. 38. 329-338 (2001)
[Publications] Fujita, K. et al.: "Screening of organosulfur compounds as inhibitors of human CYP2A6"Drug Metab.Dispos. 29. 983-989 (2001)
[Publications] Fujita, K. et al.: "Role of Human Cytochrome P450 (CYP) in the Metabolic Activation of N-alkylntrosamines : Application of Genetically Engineered Salmonella Typhimurium YG7108 Expressing Each Form of CYP Together with Human NADPH-cytochrome P450 Reductase"Mutat. Res.. 483. 35-41 (2001)
[Publications] Ariyoshi N. et al.: "Comparison of the Levels of Enzymes Involved in Drug Metabolism between Transgenic or Gene-knockout and the Parental Mice"Toxicologic Pathology. 29. 161-172 (2001)
[Publications] Ariyoshi N., et al.: "A single nucleotide polymorphism of CYP2B6 found in Japanese enhances catalytic activity by autoactivation"Biochem. Biophys. Res. Commun. 281. 1256-1260 (2001)
[Publications] 鎌滝哲也: "人類とバイオ-ナノ・バイオへの期待-"東京テクノ・フォーラム21事務局、東京. 30 (2001)

2001 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト胎児肝に特異的に発現しているCYP3A7の発現調節機構に関する研究

Principal Investigator

鎌滝 哲也 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 教授 (00009177)

Research Products

[Publications] Fujita, K. et al.: "Predicting the Mutagenicity of Tobacco-related N-Nitrosamines in Humans Using Eleven Strains of Salmonella Typhimurium YG7108 Each Co-expressing a Form of Human Cytochrome P450 with NADPH-cytochrome P450 Reductase"Environ.Mol.Mutagen.. 38. 339-346 (2001)

[Publications] Fujita, K. et al.: "Construction of Salmonella typhimurium YG7108 strains, each coexpressing a form of human cytochrome P450 with NADPH-cytochrome P450 reductase"Environ.Mol.Mutagen.. 38. 329-338 (2001)

[Publications] Fujita, K. et al.: "Screening of organosulfur compounds as inhibitors of human CYP2A6"Drug Metab.Dispos. 29. 983-989 (2001)

[Publications] Ariyoshi N. et al.: "Comparison of the Levels of Enzymes Involved in Drug Metabolism between Transgenic or Gene-knockout and the Parental Mice"Toxicologic Pathology. 29. 161-172 (2001)

[Publications] Ariyoshi N., et al.: "A single nucleotide polymorphism of CYP2B6 found in Japanese enhances catalytic activity by autoactivation"Biochem. Biophys. Res. Commun. 281. 1256-1260 (2001)

[Publications] 鎌滝 哲也: "人類とバイオ-ナノ・バイオへの期待-"東京テクノ・フォーラム21事務局、東京. 30 (2001)

鎌滝哲也北海道大学, 大学院・薬学研究科, 教授 (00009177)

[Publications] 鎌滝哲也: "人類とバイオ-ナノ・バイオへの期待-"東京テクノ・フォーラム21事務局、東京. 30 (2001)