2000 Fiscal Year Annual Research Report
HNK-1抗原の生合成に関与するグルクロン酸転移酵素とその機能に関する研究
Project/Area Number |
12470497
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
川嵜 敏祐 京都大学, 薬学研究科, 教授 (50025706)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岡 昌吾 京都大学, 薬学研究科, 助教授 (60233300)
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Keywords | HNK-1抗原 / グルクロン酸転移酵素 / mRNA / 染色体遺伝子 |
Research Abstract |
代表者らはすでにラット脳cDNAライブラリーよりHNK-1糖鎖抗原の生合成に関わる二種のグルクロン酸転移酵素(GlcAT)のクローニングに成功しこれをGlcAT-PおよびGlcAT-Sと名付け、それぞれについて生化学的、細胞生物学的研究を進めている。本年度の研究においてはヒトGlcAT-P遺伝子を初めてクローニングし、本酵素が334アミノ酸残基よりなるII型の膜タンパク質であること、また、そのゴルジ内腔側に位置する触媒ドメインはラットGlcAT-Pと6個のアミノ酸が異なるのみで、98.2%のアミノ酸相同性を示すこと、しかし、細胞質ドメインにはヒト酵素はラット酵素に対して13個短い特徴を示すことを明らかにした。また、全長cDNAを用いたnorthern blot分析の結果、GlcAT-PmRNAはラットの場合同様に、神経系組織に高発現がみられ、心臓、腎臓、膵臓、筋肉などには見られなかったが、肝臓にも明瞭なシグナルが検出された。この肝臓での発現はラットにはみられない特徴的なものであり、その意義の解明は今後の検討にまたねばならないが、免疫系細胞に発現するHNK-1糖鎖抗原の生合成に関与するものかもしれない。Genomic southern blot解析の結果は、ヒトGlcAT-P遺伝子はシングルコピー遺伝子であることを示していたので、次に、本遺伝子の染色体上での位置をFISH法により決定した、その結果、11番染色体の11q25に位置することが決定された。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] S.Oka et al.: "The N-glycan acceptor specificity of a glucuronyltransferase, GlcAT-P, associated with biosynthesis of the HNK-1 epitope."Glycoconjugate J.. (in press). (2001)
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[Publications] R.Katsuyama et al.: "Expression of macrophage asialoglycoprotein-binding protein is induced through MAPK classical pathway."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 280(5). 1269-1273 (2001)
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[Publications] Y.Mitsumoto et al.: "Cloning and chromosomal mapping of human glucronyltransferase involved in biosynthesis of the HNK-1 carbohydrate epitope."Genomics. 65(2). 166-173 (2000)
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[Publications] K.Ohtsubo et al.: "Studies on the structure-function relationship of the HNK-1 associated glucuronyltransferase, GlcAT-P, by computer modeling and site directed mutagenesis."J.Biochem.. 128(2). 283-291 (2000)
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[Publications] T.Kanazawa et al.: "Inhibition of cytokinesis by a lipid metabolite, psychosine."J.Cell Biol.. 149(4). 943-950 (2000)
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[Publications] T.Seiki et al.: "Molecular cloning and expression of a second glucuronylt ransferase involved in the biosynthesis of the HNK-1 carbohydrate epitope."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 255(1). 182-187 (1999)