個別薬物療法のための薬物代謝酵素の遺伝的多型情報の収集と評価に関する基礎的検討研究

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12470523
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 横井 毅 金沢大学, 医学研究科, 教授 (70135226)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 中嶋 美紀 金沢大学, 医学研究科, 助教授 (70266162)
• Keywords: 薬物代謝酵素 / SNPs / チトクロムP450 / ニコチン / 遺伝子診断 / トランスポーター / トログリタゾン / CYP2A6

Research Abstract

(1)ヒト薬物代謝酵素であるCYP2A6について、ヒトin vivo表現型と遺伝子型の相関について詳しく検討した。(2)ヒトにのみ特異的に肝障害を誘発するトログリタゾンについて様々な検索を行った。
1については、ニコチン代謝能を評価した健常日本人92名および韓国人209名の末梢血ゲノムDNAについて、CYP2A6^*1X2(野生型の重複)、CYP2A6^*6(エクソン3における一塩基変異型)、CYP2A6^*7(エクソン9における一塩基変異型)、CYP2A6^*8(エクソン9における一塩基変異型)の遺伝子型をPCR法により判定した。その結果、ニコチン代謝酵素活性の低い5名の被験者はヘテロCYP2A6^*4であったが、片方のアレルはいずれもCYP2A6^*7であった。特に低い活性を示した2名はCYP2A6^*7とCYP2A6^*8の変異を両方有する新規遺伝子型であった(CYP2A6^*10)。CYP2A6^*1X2、CYP2A6^*7、CYP2A6^*8の遺伝子頻度は日本人で0%、6.0%、2.2%であったのに対し、韓国人では0.2%、3.8%、1.4%と人種差が認められた。いずれの人種においてもCYP2A6^*6は認められなかった。CYP2A6^*10の遺伝子頻度は日本人で1.1%、韓国人で0.5%であった。2については、ビリルビンの体外排泄を行うトランスポーターの異常がトログリタゾン肝障害の発症原因であるという仮説のもとに、OATP-CとOATP-Bトランスポーターに注目した。2001年7月までにそれぞれ4ヶ所、2ヶ所のSNPsが報告されているが、その頻度については報告がなされていない。また、当研究室で行われているトログリタゾン誘発性肝障害を生じた患者2名の遺伝子解析において2ケ所のSNPsが明らかになっている。そこでこれらSNPsの遺伝子頻度を明らかにするために日本人267名について多型判定を行った。すなわちOATP-C、OATP-B遺伝子上のそれぞれ4ケ所、2ケ所の変異についてPCR-RFLP法、AS-PCR法のいずれかで判定を行った。OATP-Cに新規遺伝子型である0ATP-C^*15を発見した。267名における遺伝子頻度はOATP-Cについて、OATP-C^*1a, 35.2% ; OATP-C^*1b, 53.7% ; OATP-C^*5, 0.7% ; OATP-C^*15, 10.3%、OATP-Bについて、OATP-B^*1, 69.1% ; OATP-B^*3, 30.9だった。過去の報告との比較によりOATP-Cの4ケ所の変異には人種差が存在することが明かとなった。
以上、成果は日本薬物動態学会年会および日本薬学会年会で発表済みまたは発表予定であり、さらに論文として既に発表済み、投稿中または投稿準備中である。

Research Products

• [Publications] Yui Yamamoto et al.: "Formation of a novel epoxide form of quinone metabolite of troglidazone with cytotoxicity to HepG2 cells"Drug Metab. Dispos.. 30. 155-160 (2002)
• [Publications] Yui Yamamoto et al.: "Cytotoxicity and apoptosis produced by trogilitazone in human hepatome cells"Life Sci.. 70. 471-482 (2002)
• [Publications] Tomoko Komatsu et al.: "Involvement of microsomal cytochrome P450 and cytosolic thymidine phosphorylase in 5-flurouracil formation from tegafur in human liver"Clin. Cancer Res. 7. 675-681 (2001)
• [Publications] Miki Katoh et al.: "Inhibitory effects of CYP3A4 substrates and their metabolites on P-glycoprotein-mediated transport"Eur. J. Pharmacol. Sci. 12. 505-513 (2001)
• [Publications] Jun-Tack Kwon et al.: "Ncotine metabolism and CYP2A6 allele frequencies in Koreans"Pharmacogenetics. 11. 317-323 (2001)
• [Publications] Miki Nakajima et al.: "Relationship between interindividual differences of nicotine metabolism and CYP2A6 genetic polymorphism in humans"Clin. Pharmacol. Ther. 69. 72-78 (2001)