2000 Fiscal Year Annual Research Report
電離放射線の細胞への影響を細胞工学的手法でアッセイする糸の開発
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12480155
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| Research Institution | Kawasaki Medical School |
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Principal Investigator |
高田 穣 川崎医科大学, 医学部, 教授 (30281728)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
武田 俊一 京都大学, 医学研究科, 教授 (60188191)
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| Keywords | 相同DNA組み換え / Rad51 / Rad52 / XRCC3 |
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| Research Abstract |
1.多数のDNA修復経路の変異細胞株を樹立した。具体的には、Rad51ファミリー5種類の変異細胞株、Rad51ファミリーの一つXrcc3とRad52との二重変異株、DNA-PK/KU70二重変異株、DNA-PK/Rad54二重変異株などである。こららの株を用いて、Rad51ファミリーが一つの機能的複合体としてはたらくこと、Xrcc3とRad52が合成致死であること(したがって、Rad52の機能をXrcc3が相補していることが示唆された)、ku複合体が相同組換えの機能を抑制する活性を持つことを示した。2.HPRTのへテロ変異細胞を樹立した。現在6TG選択下に、LOHの出現頻度を調べている。3.遺伝研深川博士らはDT40において使用できる染色体ペインティングプローブを開発した。かれらと共同でDT40変異細胞における染色体をペインティングによって検索する予定である。深川博士らの検索によればRad51ファミリーにおいてはあまり変化が見られていない。4.Jasinらによって開発された人工組みかえ基質を挿入したDT40を作成した。この細胞にI-Sce Iを発現させ、相同組換えと非相同末端結合の出現頻度を測定することが可能となった。しかし、リアルタイムで修復をモニターすることはこのままの系ではむつかしい。I-SceIの発現に工夫することでそれが可能となるかもしれない。
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[Publications] Takata M: "The Rad51 Paralog Rad51 B Promotes Homologous Recombinational Repair."Mol Cell Biol. 20. 6476-6482 (2000)
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[Publications] Motoda K: "SHP-1/ITIM-independent inhibitory signaling through murine NK cell receptor Ly-49A in a transfected B cell line."Immunology. 100. 370-377 (2000)
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[Publications] Kurosaki T: "Regulation of phosholipase C-r2 pathway in B cells."Immunol Rev. 176. 19-29 (2000)
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[Publications] Kurosaki T: "B cell-receptors. In Encyclopedia of Life Sciences."Macmillan Reference Limited, Hampshire, England. (in press).
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[Publications] Takata M: "Chromosome instability and defective recombinational repair in knockout mutants of the five Rad51 paralogs."Mol Cell Biol. (in press).
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[Publications] Sonoda E: "Reverse genetic studies of homologous DNA recombination using the chicken B-lymphocyte line, DT40."Phil Trans R Soc Lond B. 356. 111-117 (2001)
