2002 Fiscal Year Annual Research Report
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12480173
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
牧野 圭祐 京都大学, 国際融合創造センター, 教授 (50159141)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
金折 賢二 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 助教授 (30273543)
森井 孝 京都大学, エネルギー理工学研究所, 講師 (90222348)
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| Keywords | 一酸化窒素 / 塩基損傷 / デオキシオキザノシン / 腫瘍学 |
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| Research Abstract |
一酸化窒素(NO)と遺伝子中の塩基との反応を詳細に検討し、NOによる塩基損傷の多くを同定した。また、損傷に対するrepair enzymeの有無に対する検討を行った。さらには、損傷塩基を含むDNAオリゴマーを調製するためのモノマー作成を行った。得られた結果を以下に総合的に纏める。
・アミノ基反応性損傷として、デオキシグアノシン(dGuo)からデオキシオキザノシン(dOxe)およびdGuo-diazoate、デオキシシチジン(dCyd)からdCyd-diazoateを発見し、p53遺伝子中のメチル化dCydにも同様のdiazoateが生成し、G/C→A/T変異ならびに架橋生成を生じることを明らかにした。さらにNO_2によって、dGuoから8-NO-dGuoおよびexoアミノ基がニトロソ化された損傷を発見し、dGuoに関する損傷のほとんどを同定する事に成功した。
・最も重篤な損傷と考えているdOxoに対し、既知修復酵素であるUracil DNA glycosylase (dUrd)、3-Methyladenine DNA glycosylase II(基質: alkylated purines)、Formamidopyrimidine glycosylase、EndonucleaseIII、EndonucleaseVIII(基質: oxdized pyrimidines)の認識能を検討したが、これらによる認識は観察されなかった。デオキシオキザノシンは安定な損傷である可能性が高く、重篤である。
・dOxoの腫瘍学的特性の酵素・細胞レベルでの検討のために、dOxoを有するDNAオリゴマー合成のためのアミダイトモノマー作成を行った。一般のヌクレオシドに比べ、5'基のDMTr保護反応が進行しないため、詳細に検討し、メシレート・イミダゾール触媒系で30%収率を獲得することに成功し、現在アミダイト化を行っている。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] T.Suzuki, M.Yamada, T.Nakamura, H.Ide, K.Kanaori, K.Tajima, T.Morii, K.Makino: "Formation of a fairy stable diazoate intermediate of 5-methyl-2'-deoxycytidine by HNO2 and NO, and its implication to a novel mutation mechanism in CpG site"Bioorg. & Med. Chem. 10. 1063-1067 (2002)
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[Publications] H.Terato, A.Masaoka, K.Asagoshi, A.Honsho, Y.Ohyama, T.Suzuki, M.Yamada, K Makino, K.Yamamoto, H.Ide: "Novel repair activities of AlkA (3-methyladenine DNA glycosylase II) and endonuclease VIII for xanthine and oxanine, guanine lesions induced by nitric oxide and nitrous acid"Nucleic Acids Res.. 30. 4975-4984 (2002)
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[Publications] T Morii, T.Tanaka, S.Sato, M.Hagiwara, Y.Aizawa, K.Makino: "A general strategy to determine a target DNA sequence of a short peptide : Application to a D-peptide"J. Am. Chem. Soc.. 124. 180-181 (2002)
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[Publications] T.Morii, S.Sato, M.Hagiwara, Y.Mori, K.Imoto, K.Makino: "Structure-based design of a leucine zipper protein with new DNA contacting region"Biochemistry. 41. 2177-2183 (2002)
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[Publications] T.Morii, K.Sugimoto, M.Otsuka, Y.Mori, K.Imoto, K.Makino: "A new fluorescent biosensor for inositol triphosphate"J. Am. Chem. Soc.. 124. 1138-1139 (2002)
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[Publications] T.Morii, M.Hagihara, S.Sato, K.Makino: "In vitro selection of ATP-binding receptors using a ribonucleopeptide complex"J. Am Chem. Soc.. 124. 4617-4622 (2002)
