2000 Fiscal Year Annual Research Report
テンサイにおける稔性回復核遺伝子のクローン化と育種利用に関する研究
Project/Area Number |
12556001
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Research Institution | Hokkaido University |
Principal Investigator |
三上 哲夫 北海道大学, 大学院・農学研究科, 教授 (50133715)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田中 征勝 農林水産省, 北海道農業試験場・畑作研究センター, 室長(研究職)
貴島 祐治 北海道大学, 大学院・農学研究科, 助教授 (60192556)
久保 友彦 北海道大学, 大学院・農学研究科, 助手 (40261333)
池口 正二郎 ホクレン農業組合, 研究所, 主任研究員
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Keywords | テンサイ / 細胞質雄性不稔性 / 稔性回復核遺伝子 / AFLP / RFLP / BACライブラリー / ポジショナルクローニング / X遺伝子 |
Research Abstract |
今年度得られた研究成果は次の通りである。 [1]Rfと密接に連鎖するAFLPマーカー AFLP解析を進めることにより、稔性回復核遺伝子(Rf)を挟んで3cM以内に6個のマーカーを設置することに成功した。しかも、このうち2個はRfと完全に共分離する。また異なる交配組み合わせを用いた集団においても、これらのマーカーはほぼ同様の分離を示すことを確かめた。 [2]マーカーの帰属する連鎖群 従来用いていた集団とは別に、細胞質雄性不稔系統1-12CMS(R)を反復親とする連続戻し交配により育成した集団を供しRFLP分析を行い、得られたマーカーの帰属する連鎖群を決定した。その結果、全てのマーカーはドイツキールグループのいう第3連鎖群(ケルングループの第4連鎖群に相当)に位置することが分かった。テンサイの細胞質雄性不稔においては2個のRf(X,Zと称す)が補足的に働いている。今回得られたマーカーはいわゆるX遺伝子に隣接することが明らかになった。今後X遺伝子単離に向けてポジショナルクローニングを進める予定である。また、もう一方のRf遺伝子(Z)についても、連鎖するマーカーの単離を進めたい。 [3]BACライブラリーの作製 BAC (Bacterial Artificial Chromosome)ライブラリーの構築を進めた。その結果、約3万クローンを集めることに成功した。予備的に調査したところ、平均挿入断片長は約100kbpであった。このようにポジショナルクローニングに必要となるクローンを集めることに成功したが、挿入断片長の短いクローンが少なからず含まれていること、ならびにオルガネラDNAの混入の可能性を排除できない、といった問題点が残されており、ライブラリーの評価を厳密に行う必要がある。
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[Publications] S.Nishizawa: "Variable number of tandem repeat loci in the mitochondrial genomes of beets."Current Genetics. 37. 34-38 (2000)
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[Publications] T.Kubo: "The nad4L-orf25 gene cluster is conserved and expressed in sugar beet mitochondria."Theoretical and Applied Genetics. 100. 214-220 (2000)
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[Publications] T.Kubo: "The complete nucleotide sequence of the mitochondrial genome of sugar beet (Beta vulgaris L) reveals a novel gene for tRNACys (GCA)."Nucleic Acids Research. 28. 2571-2576 (2000)
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[Publications] S.Kato: "The chloroplast genomes of azuki bean and its close relatives : a deletion mutation found in weed azuki bean."Hereditas. 132. 43-48 (2000)
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[Publications] S.Kato: "Analysis of mitochondrial DNA of an endangered beech species, Fagus hayatae Palibin ex Hayata."New Forests. 19. 109-114 (2000)
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[Publications] T.Mikami: "Molecular analysis of cytoplasmic male sterility in beets."Acta Horticulturae. ( in press ) . (2000)
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[Publications] 三上哲夫: "花-性と生殖の分子生物学(日向康吉 編)"学会出版センター(印刷中). (2001)
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[Publications] 三上哲夫: "栽培植物の自然史(山口裕文 編)"北海道大学図書刊行会(印刷中). (2001)